[发明专利]一种短小芽孢杆菌KMXU56及其接种剂无效

专利信息
申请号: 201210575904.8 申请日: 2012-12-27
公开(公告)号: CN103013887A 公开(公告)日: 2013-04-03
发明(设计)人: 余磊;赵建荣 申请(专利权)人: 昆明学院
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C05F17/00;C12R1/07
代理公司: 昆明今威专利商标代理有限公司 53115 代理人: 杨宏珍
地址: 650214 云南*** 国省代码: 云南;53
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摘要:
搜索关键词: 一种 短小 芽孢 杆菌 kmxu56 及其 接种
【权利要求书】:

1.一种短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus) KMXU56,其保藏号为:CGMCC No.6595。

2.含有权利要求1 所述短小芽孢杆菌KMXU56的接种剂,其特征在于该接种剂

经如下步骤得到:

(1)、菌种活化:取短小芽孢杆菌KMXU56的菌种接种于LB液体培养基:胰蛋白胨10g/L,酵母萃取物5g/L,NaCl 10g/L, pH7.0中,在30-35℃条件下培养3-5d;

(2)、发酵种子液制备:将活化的菌种接种于LB液体培养基 进行一级扩大培养,当培养液OD600在大于1.3时停止培养,得一级种子;将一级种子按体积比8%接种至LB液体培养基进行二级扩大培养,当培养液OD600 在大于2.5时停止培养,得发酵种子液;一级、二级培养条件均为30-35℃,转速为150-180r/min,培养时间为5-7d;

(3)、接种剂的制备:在含水量为40%-50% 的稻壳堆中添加尿素和蔗糖,24h 后,再在稻壳堆中均匀泼洒麸皮、玉米粉和发酵种子液进行堆置发酵,期间翻堆,至温度稳定在环境温度时,停止发酵,将发酵产物干燥,制得接种剂;其中:

a.尿素和蔗糖的添加方法为:分别按稻壳干重质量比0.5%和2%称取尿素和蔗糖,将尿素和蔗糖与水按重量比1:20 配成溶液,均匀泼洒稻壳堆中;

b.麸皮、玉米粉和发酵种子液的添加方法为:将按稻壳堆干重1% 的麸皮、2% 的玉米粉和2% 的步骤(2)得到的发酵种子液混合,混拌均匀后泼洒在稻壳堆中,稻壳堆体高度0.6-1.8m,占地面积 < 50m2,盖上透气性覆盖物进行堆置发酵;

c.当发酵温度达到60-65℃并持续 42-48h 后,进行第1 次翻堆,按照前述方法再翻堆4-8 次,直到温度稳定在环境温度后,将发酵产物在45-55℃下烘干4h,得固态接种剂。

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