[发明专利]一种短小芽孢杆菌KMXU56及其接种剂无效
申请号: | 201210575904.8 | 申请日: | 2012-12-27 |
公开(公告)号: | CN103013887A | 公开(公告)日: | 2013-04-03 |
发明(设计)人: | 余磊;赵建荣 | 申请(专利权)人: | 昆明学院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C05F17/00;C12R1/07 |
代理公司: | 昆明今威专利商标代理有限公司 53115 | 代理人: | 杨宏珍 |
地址: | 650214 云南*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 短小 芽孢 杆菌 kmxu56 及其 接种 | ||
1.一种短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus) KMXU56,其保藏号为:CGMCC No.6595。
2.含有权利要求1 所述短小芽孢杆菌KMXU56的接种剂,其特征在于该接种剂
经如下步骤得到:
(1)、菌种活化:取短小芽孢杆菌KMXU56的菌种接种于LB液体培养基:胰蛋白胨10g/L,酵母萃取物5g/L,NaCl 10g/L, pH7.0中,在30-35℃条件下培养3-5d;
(2)、发酵种子液制备:将活化的菌种接种于LB液体培养基 进行一级扩大培养,当培养液OD600在大于1.3时停止培养,得一级种子;将一级种子按体积比8%接种至LB液体培养基进行二级扩大培养,当培养液OD600 在大于2.5时停止培养,得发酵种子液;一级、二级培养条件均为30-35℃,转速为150-180r/min,培养时间为5-7d;
(3)、接种剂的制备:在含水量为40%-50% 的稻壳堆中添加尿素和蔗糖,24h 后,再在稻壳堆中均匀泼洒麸皮、玉米粉和发酵种子液进行堆置发酵,期间翻堆,至温度稳定在环境温度时,停止发酵,将发酵产物干燥,制得接种剂;其中:
a.尿素和蔗糖的添加方法为:分别按稻壳干重质量比0.5%和2%称取尿素和蔗糖,将尿素和蔗糖与水按重量比1:20 配成溶液,均匀泼洒稻壳堆中;
b.麸皮、玉米粉和发酵种子液的添加方法为:将按稻壳堆干重1% 的麸皮、2% 的玉米粉和2% 的步骤(2)得到的发酵种子液混合,混拌均匀后泼洒在稻壳堆中,稻壳堆体高度0.6-1.8m,占地面积 < 50m2,盖上透气性覆盖物进行堆置发酵;
c.当发酵温度达到60-65℃并持续 42-48h 后,进行第1 次翻堆,按照前述方法再翻堆4-8 次,直到温度稳定在环境温度后,将发酵产物在45-55℃下烘干4h,得固态接种剂。
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