[发明专利]A群轮状病毒检测免疫试纸及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种A群轮状病毒检测免疫试纸及其制备方法。

背景技术

目前，猪轮状病毒（Porcine rotavirus，PoRV）属呼肠孤病毒科轮状病毒属，轮状病毒感染是引起仔猪爆发消化道机能紊乱的一种急性肠道传染病，以呕吐、腹泻、脱水和酸碱平衡紊乱为特征，给养猪业带来严重的危害。PoRV存在多种血清型，我国猪群中轮状病毒的感染以A群为主，在A群PoRV中VP6蛋白是群抗原，在各毒株中高度保守。我国PoRV的诊断主要还是依赖于常规实验室诊断，其操作过程复杂、耗时，并且需要昂贵的仪器，从而使得A群轮状病毒的检测较为麻烦。

发明内容

基于此，有必要提供一种检测较为简便的A群轮状病毒检测免疫试纸及其制备方法。

一种A群轮状病毒检测免疫试纸，包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和背衬，所述样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜及吸水垫粘结在背衬上，所述结合垫的两端分别与所述样品垫及所述硝酸纤维素膜搭接，所述硝酸纤维素膜远离所述结合垫的一端与所述吸水垫搭接，所述硝酸纤维素膜上设有相互间隔的检测线及质控线，所述结合垫上设有A群猪轮状病毒单克隆抗体A-荧光标记物，所述检测线由A群猪轮状病毒单克隆抗体B构成，所述质控线由羊抗鼠IgG构成。

在其中一个实施例中，所述结合垫与所述样品垫搭接的长度为1.5mm~2.5mm。

在其中一个实施例中，所述结合垫与所述硝酸纤维素膜搭接的长度为1.5mm~2.5mm。

在其中一个实施例中，所述硝酸纤维素膜与所述吸水垫搭接的长度为1.5mm~2.5mm。

在其中一个实施例中，所述背衬的材料为聚氯乙烯。

一种A群轮状病毒检测免疫试纸的制备方法，包括以下步骤：

将A群猪轮状病毒单克隆抗体A与荧光纳米颗粒混合制成A群猪轮状病毒单克隆抗体A-荧光标记物；

将A群猪轮状病毒单克隆抗体A-荧光标记物包被在结合垫上；

将A群猪轮状病毒单克隆抗体B包被在硝酸纤维素膜上形成检测线；

将羊抗鼠IgG包被在硝酸纤维素膜上形成与所述检测线相间隔的质控线；

将样品垫、结合垫、包有A群猪轮状病毒单克隆抗体A-荧光标记物的结合垫以及具有检测线和质控线的硝酸纤维素膜依次粘贴在背衬上得到所述A群轮状病毒检测免疫试纸，所述结合垫的两端分别与所述样品垫及所述硝酸纤维素膜搭接，所述硝酸纤维素膜远离所述结合垫的一端与所述吸水垫搭接。

在其中一个实施例中，所述荧光纳米颗粒的粒径为50nm。

在其中一个实施例中，将得到的A群轮状病毒检测免疫试纸放置于两个平板之间压制10分钟。

在其中一个实施例中，将得到的A群轮状病毒检测免疫试纸裁切成条状。

在其中一个实施例中，所述背衬的材料为聚氯乙烯。

上述A群轮状病毒检测免疫试纸使用时，将样品滴加在样品垫上，阳性结果呈现两条线，即质控线和检测线，阴性结果只出现一条质控线，检测快速简便；A群轮状病毒检测免疫试纸的制备方法较为简单。

附图说明

图1为一实施方式的A群轮状病毒检测免疫试纸的结构示意图；

图2为一实施方式的A群轮状病毒检测免疫试纸的制备方法的流程图。

具体实施方式

为了便于理解本发明，下面将参照相关附图对本发明进行更全面的描述。附图中给出了本发明的首选实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容更加透彻全面。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“及／或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

请同时参阅图1，一实施方式的A群轮状病毒检测免疫试纸10包括样品垫1、结合垫2、硝酸纤维素膜3、背衬6和吸水垫7。样品垫1、结合垫2、硝酸纤维素膜3及吸水垫7依次粘结在背衬6上。结合垫2的两端分别与样品垫1及硝酸纤维素膜3搭接，硝酸纤维素膜3远离结合垫2的一端与吸水垫7搭接。

样品垫1是试纸条检测时直接与样品溶液互相接触的部分，起到了过滤样品溶液中的非可溶性杂质成分的作用。

结合垫2上设有A群猪轮状病毒单克隆抗体A-荧光标记物。A群猪轮状病毒单克隆抗体A-荧光标记物可与目标蛋白发生抗原-抗体特异性结合。