[发明专利]一种用免疫比浊法测定载脂蛋白C2的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及医学免疫体外诊断试剂领域，具体涉及一种用免疫比浊法测定载脂蛋白C2（APOC2）的试剂盒。

背景技术

人Apo CII为含79个氨基酸残基的单链多肽，分子量为9.1kD。先合成的Apo CII含101氨基酸残，其中22个氨基酸构成信号肽，除去信号肽后则转变为成熟Apo CII。对Apo CII的氨基酸序列进行Chuo-Fasman分析表明：Apo CII的第13-22，29-40，43-52氨基酸残基为双性α螺旋，具有与脂质结合的功能，第9-12、23-26、53-56氨基酸残基为β转角结构，第61-74AA残基为α-双性螺旋，是与脂质结合的区域，第1-39、54-69氨基酸残基为β-转角结构。对Apo CII溴化氰水解片段或合成片段的研究表明：Apo CII激活低密度脂蛋白的肽段为羧基端56-79氨基酸残基，其激活作用可被具有结合磷脂活性的第44-55氨基酸残基段加强；切除Apo CII羧基末端3个氨基酸残基，Apo CII激活低密度脂蛋白的活性完全丧失。

低密度脂蛋白是乳糜微粒和极低密度脂蛋白水解的关键酶。研究表明：ApoCII是低密度脂蛋白不可缺少的激活剂，Apo CII缺乏时，低密度脂蛋白活性极低；Apo CII存在时，低密度脂蛋白活性可增加10-50倍，因此Apo CII具有促进乳糜微粒和将极低密度脂蛋白降解的作用。Apo CII激活将低密度脂蛋白的机理可能是：Apo CII从″酶-底物″中间体接受脂酰基,然后将其转移到白蛋白上。Apo CII还具有抑制肝脏对乳糜微粒和极低密度脂蛋白摄取的作用。在体外试验中发现，Apo CII还可抑制肝甘油三酯脂肪酶活性,抑制程度与Apo CII浓度呈线性关系。由于肝脂酶可催化经将低密度脂蛋白作用后脂蛋白残粒中三酰甘油水解,因此Apo CII亦可能参与血浆中脂蛋白残粒的清除过程。因此，Apo CII对脂蛋白的结构、功能和代谢至关重要，可以为诊断脂质代谢疾病提供有价值的指标。

现有的APOC2检测技术存在诸多不足：如需要特殊的设备，样本需要预处理，不能上全自动生化分析仪进行批量检测分析等。酶联免疫法应用比较普遍，其原理是将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体；洗涤除去未结合的抗体及杂质；加待测样品，使之与固相抗体反应一段时间，让样品中抗原与固相载体上的抗体结合；洗涤除去未结合的物质；加酶标抗体，使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合；洗涤除去未结合的酶标抗体；此时固相载体上的酶量与样品中的待测物质的量正相关；加入底物反应显色。根据颜色反应的程度对测定物质进行定性或定量测定。该方法为非均相免疫检测系统，测定过程较为繁琐，耗时长，缺少单位测试运行时间；自动化程度不高，批间差和重复性相对较大；需要配备多种专门设备，一定程度上增加了成本。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种用免疫比浊法测定载脂蛋白C2的试剂盒，其操作简单、准确度高、重复性好、可进行批量样本全自动化检测，从而消除上述背景技术中缺陷。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种用免疫比浊法测定载脂蛋白C2的试剂盒，该试剂盒包含试剂R1、试剂R2和校准品，其中，

试剂R1包含缓冲液10～500mM、表面活性剂1～100g/L、电解质5～50g/L、高分子加速剂2～100g/L、稳定剂1～50g/L、防腐剂1～10g/L；

试剂R2包含缓冲液10～500mM、抗人APOC2抗体15%～30%（w/v）、电解质5～50g/L、防腐剂1～10g/L；

校准品包含缓冲液10～500mM、APOC2抗原0～100mg/L、稳定剂1～50g/L、防腐剂1～10g/L、抗氧化剂0.01～10g/L。

上述缓冲液10～500mM，即为10～500mmol/L；抗人APOC2抗体15%～30%（w/v），即为抗人APOC2抗体浓度为150～300g/L。

作为一种改进，上述试剂盒中，

所述缓冲液为磷酸盐、硼酸、甘氨酸、TRIS、PBS、CAPSO、HEPES缓冲液中的一种或几种；

抗人APOC2抗体包括鼠抗人、兔抗人、羊抗人、鸡抗人、鸭抗人抗体中的一种或两种；

抗人APOC2抗体的种类包括单克隆抗体或多克隆抗体中的一种；

所述电解质包括氯化钠、氯化镁、氯化钾、硫酸镁中的一种或几种；

所述高分子加速剂包括聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000中的一种或多种；