[发明专利]基于纳米金模拟过氧化物酶的硫离子测定方法

权利要求书

1.一种基于纳米金模拟过氧化物酶的硫离子快速测定方法，其特征是利用纳米金与硫离子相互作用后其模拟过氧化物酶活性的变化，通过纳米金催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色，根据溶液颜色和/或紫外吸收光谱特征的变化，来测定硫离子浓度。

2.根据权利要求1所述的基于纳米金模拟过氧化物酶的硫离子快速测定方法，其特征是利用目视观察溶液颜色特征以判断硫离子的浓度。

3.根据权利要求1所述的基于纳米金模拟过氧化物酶的硫离子快速测定方法，其特征是利用紫外吸收光谱的吸光度值A₆₅₂以判断硫离子的浓度。

4.根据权利要求1或2或3所述的基于纳米金模拟过氧化物酶的硫离子快速测定方法，其特征是所使用的纳米金采用硼氢化钠还原氯金酸的方法制备，将500 μL浓度为 0.1 g/L 氯金酸水溶液用39.5毫升的水稀释，在剧烈搅拌下加入0.8毫升浓度为0.1 g/L的硼氢化钠水溶液，反应溶液颜色从浅黄色变成酒红色，暗处继续快速搅拌而形成纳米金。

5.根据权利要求1或4所述的基于纳米金模拟过氧化物酶的硫离子快速测定方法，其特征是按体积比为1:3将纳米金溶液和含不同浓度硫离子的溶液混合，室温放置后，加入0.075 ml浓度为8 mol/L的过氧化氢、0.05 ml浓度为16 mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐、0.675 ml浓度为20 mmol/L的磷酸盐缓冲溶液，混合后45 ℃温浴然后目视观察颜色特征或测定吸光度值A₆₅₂，当目视观察颜色特征时，随着硫离子浓度的增大，显色液的颜色逐渐由深蓝色变为浅蓝色直至无色，目视观察的检测限为2 μmol/L；当测定吸光度值A₆₅₂时，随着硫离子浓度的增大而吸光度值A₆₅₂逐渐减小，在0.5~10 μmol/L 范围内吸光度值A₆₅₂与硫离子浓度呈线性关系，检测限为0.08 μmol/L。

6.根据权利要求5所述的基于纳米金模拟过氧化物酶的硫离子快速测定方法，其特征是纳米金溶液和含不同浓度硫离子的溶液的体积分别为0.1 mL和0.3 mL。

7.根据权利要求5所述的基于纳米金模拟过氧化物酶的硫离子快速测定方法，其特征是纳米金溶液和含不同浓度硫离子的溶液混合后室温放置时间为1~15分钟，优选为1分钟。

8.根据权利要求5所述的基于纳米金模拟过氧化物酶的硫离子快速测定方法，其特征是所使用磷酸盐缓冲溶液pH值为3~4.5，优选为4。

9.一种基于纳米金模拟过氧化物酶特性快速测定水样中硫离子的方法，包括如下步骤：取0.15 ml经0.22 μm滤膜过滤的水样，加入0.05 ml纳米金溶液，混合后在室温放置1分钟，在混合溶液中加入0.075 ml浓度为8 mol/L的过氧化氢、0.05 ml浓度为16 mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐、0.675 ml  pH为4的20 mmol/L磷酸盐缓冲溶液，20 mmol/L磷酸盐缓冲溶液中含有7.4 mmol/L乙二胺四乙酸，混合后45 ℃温浴然后目视观察颜色变化或测定吸光度A₆₅₂，根据溶液颜色与比色标准系列比较或通过吸光度值标准曲线进行定量，获得水样中的硫离子含量。

10.根据权利要求9所述的基于纳米金模拟过氧化物酶特性快速测定水样中硫离子的方法，其特征是所使用的纳米金采用硼氢化钠还原氯金酸的方法制备，将500 μL浓度为 0.1 g/L 氯金酸水溶液用39.5毫升的水稀释，在剧烈搅拌下加入0.8毫升浓度为0.1 g/L的硼氢化钠水溶液，反应溶液颜色从浅黄色变成酒红色，暗处继续快速搅拌而形成纳米金。