[发明专利]一种检测耐药蛋白抑制因子的氨基酸序列

说明书

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，涉及一种检测耐药蛋白抑制因子的氨基酸序列。 

背景技术

白血病是一种发生在造血系统的恶性疾病。由于造血干细胞发生突变，人体内产生大量丧失正常功能的白细胞，除了聚集在骨髓、淋巴结和脾脏外，还侵入其它器官和组织，产生各种临床症状，如继发性感染、高热、出血、贫血及全身衰竭等。     白血病发病率约占整个恶性肿瘤发病率的5%左右，多见于儿童和青年人。根据病程和白血病细胞的分化程度，分为急性和慢性两类。根据受累细胞种类又分为淋巴细胞白血病和非淋巴细胞白血病。目前，白血病的致病原因和机制尚未完全阐明。但大量研究资料显示，遗传因素、病毒感染、放射线辐射及接触大量有毒化学物质（如苯类化合物等）与疾病发生有密切关系。 

白血病的临床治疗方法有多种，其中化学药物疗法（简称为化疗）常常是治疗首选方案。特别是急性白血病经化疗后，缓解率平均达60%左右，5年存活率为20~40%。急性白血病未治疗时，体内血癌细胞总数可高达10¹³个。然而经化疗后，仍有相当数量的血癌细胞残留， 估计在10⁸-10⁹个之间。这些残留血癌细胞的存在与其产生的化疗药物耐受性有关，是导致白血病的复发和病情恶化的主要原因。因此，发明一种有效治疗方法、彻底清除残留血癌细胞，是达到完全控制或根治白血病的终极目标。 

利用父母双亲外周血白细胞与富含耐药蛋白抑制因子血浆的混合输入用以清除残留血癌细胞是一种有效的治疗方法，但如何检测供血者耐药蛋白抑制因子是需要进一步解决的问题。 

发明内容

本发明要解决的技术问题是公开一种检测耐药蛋白抑制因子的氨基酸序列。 

本发明提供一种检测耐药蛋白抑制因子的氨基酸序列，其表达方式为： 

RKSWLQYFSIPRYGNLTTIASWLSWDH   纯度>95%，pH>7.0。

缩写SYJ-2。本发明氨基酸序列主要是根据计算机模拟预测的耐药蛋白抑制因子人类白细胞抗原II（human leukocyte antigen II，简称HLA II）的抗原表位设计合成并已通过分子生物学实验验证其高效的抗原性。本发明氨基酸序列可通过氨基酸多肽合成仪纯化合成。 

通过该氨基酸序列对耐药蛋白抑制因子的检测： 

参照已专利的方法检测血浆免疫球蛋白（专利号：2011103881341，主分类号：G01N33/543）。简言之，用磷酸盐缓冲液稀释人工合成的SYJ-2片段至10-20 微克/毫升（10-20μg/ml），用96孔酶标板包被，每孔加100微升（100 μl）。对照孔加100μl山羊28肽。酶标板设定SYJ-2孔、对照肽孔和试剂空白孔，每种设定应采用至少2重样、 取中间光密度（Optical Density，OD）值。来自献血者血浆样品经分析液稀释100倍，每个SYJ-2检测孔和对照肽孔各加100μl血浆样品，试剂空白孔加100 μl分析液。

根据特异性结合指数（specific binding index，SBI）判断血浆耐药蛋白抑制因子水平，即 SBI=[耐药蛋白OD值-试剂空白OD值]/[对照肽OD值-试剂空白OD值]的比值。利用SBI作为筛选献血者的参数。凡是SBI大于2且与患者ABO血型完全匹配的健康人血浆，可用于体内诱导细胞毒效应，清除具有耐药性的残留白血病细胞。 

父母双亲外周血白细胞处理与输入： 

 在遗传学上，父母双亲与子女之间有50%的遗传信息完全一致。因此，已接受化疗的患病子女在输入父母双亲外周血白细胞后不会产生强烈的免疫排斥反应。如同临床输血一样，只要血型匹配，可以不考虑人类白细胞表面抗原（Human leukocyte antigen，HLA）与受血者的组织相容性。在患者接受2-3个疗程的化疗后，抽取100-200毫升父亲或母亲的外周血，约含5-10亿具有吞噬功能的白细胞。用物理离心方法分离母亲的外周血中白细胞，无菌生理盐水洗2-3次后混合原本及富含耐药蛋白抑制因子的血浆中静脉输入患病子女体内。

本发明的优点及有益效果：