[发明专利]一种食蟹猴肌肉萎缩模型的造模方法

说明书

技术领域

本领域属于动物模型的建立方法，具体涉及一种食蟹猴肌肉萎缩模型的建立方法。需要特殊说明的是，本方法未涉及外科手术等不具实用性的方案，具备在产业上实施的条件。

背景技术

肌肉萎缩是指横纹肌营养障碍，肌肉纤维变细甚至消失等导致的肌肉体积缩小。病因主要有：神经源性肌萎缩、肌源性肌萎缩、废用性肌萎缩和其他原因性肌萎缩。目前常用的动物模型有尾部悬吊、肢体固定、去神经和去肌肉或肌腱模型等。

食蟹猴生命周期长，生物学特性与人类极其相似，是研究人类慢性疾病的最佳实验材料，用它建立的人类疾病动物模型有利于观察疾病及其并发症的发生发展规律，同时为治疗药物的疗效检验和安全性评估提供可靠的保证，已逐渐成为科学研究和药物研究中使用较多的一种灵长类实验动物；由于食蟹猴为高等哺乳动物，有着特殊的生理结构和生活习性，常规的疾病模型技术手段复制在食蟹猴上，并不能得到满意的效果，至今国内外未见有食蟹猴肌肉萎缩模型的成功报道。

发明内容

本发明旨在提供一种造模时间短、成功率高的食蟹猴肌肉萎缩模型的建立方法。本发明通过如下技术方案实现：

将体重9.0～10.0kg，6-7岁的雄性食蟹猴右下肢踝关节至膝关节以上5cm部位用高分子纤维绷带外固定，保持踝关节90°、膝关节180°体位，纤维绷带与肢体间保留0.5cm距离，确保动物右下肢无法完成重力运动，且不至于纤维绷带压迫肢体，制动时间15周；造模期间供给饲料成分与常规商业饲料相比，控制了蛋白质为13％，脂肪4％。

造模期间为巩固制动产生的肌肉萎缩，饲料配比较普通饲料配方减少了蛋白质及脂肪含量。

按照本发明提供的方法对37只食蟹猴进行造模，其中35只成功，2只失败，成功率为95％，可见本方法安全可靠，成功率高，为研究肌肉萎缩的发生机制，评价、筛选相关药物有着重要的意义。

附图说明：

图1为造模15周后动物双侧腓肠肌MRI图像比较

图2为双侧腓肠肌活检组织HE染色

具体实施方式

(一)本发明模型的建立

实施例1

选择6-7岁、雄性食蟹猴，体重9.0～10.0kg，将动物右下肢踝关节至膝关节以上5cm部位用高分子纤维绷带外固定，保持踝关节90°、膝关节180°体位，确保动物右下肢无法完成重力运动，纤维绷带与肢体间保留0.5cm距离，确保纤维绷带不压迫肢体，制动时间15周，造模期间供给饲料成分：蛋白质为13％，脂肪4％，其余为水份、纤维、矿物质等。

食蟹猴肌肉萎缩诊断模式评价方法与结果

造模3周后，动物体重、小腿腿围、右下肢体积均明显下降，3-15周期间趋于稳定；

表1食蟹猴肌肉萎缩模型一般检查表

*与造模前比较，P＜0.05

造模15周后血清总蛋白、白蛋白、尿素氮、肌酐、血糖、碱性磷酸酶均出现下降，血清胆固醇水平明显升高。

表二食蟹猴肌肉萎缩模型生化检测结果

造模15周，MRI图像显示右侧腓肠肌较左侧萎缩，右侧腓肠肌容积较左侧小；肌肉组织活检显示右侧腓肠肌萎缩，肌纤维变细。

表3食蟹猴肌肉萎缩模型腓肠肌体积检查结果

*与造模前比较，P＜0.05.

造模15周后动物双侧腓肠肌MRI图像比较(见图1)。

腓肠肌活检HE染色，肌纤维呈圆形或椭圆形，细胞核位于周边，右侧小腿腓肠肌与左侧相比较肌细胞体积变小，同倍率下肌细胞数量明显增加，单个肌细胞周径减小，肌束间隙增宽。(图2)