[发明专利]一种甲钴胺胶囊的质量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种药物制剂的质量控制方法，具体涉及甲钴胺胶囊的质量控制方法。

背景技术

扬子江药业集团南京海陵药业有限公司生产的甲钴胺注射液产品，化学名称为：Coα-[α-(5,6)-二甲基苯并咪唑基]-Coβ-甲钴酰胺，商品名为奇信，临床广泛用于多发性神经炎、三叉神经痛；脑意外事件的后遗症、脑外伤、血管硬化引起的神经障碍；失眠、多梦、烦躁、易怒；酒精性神经炎；自律神经障碍等。甲钴胺化学性质不稳定，在加热或强光照射条件下，化学结构会发生变化会生成其它杂质，但是现有的检测方法，甲钴胺易分解，分离效果不好，检测灵敏度不高，稳定性很差，检测结果不准确。因此为了控制好甲钴胺胶囊制剂的临床安全性，维护患者的利益，很有必要在现有技术的基础之上研究设计出能准确检测甲钴胺胶囊制剂中有效成分甲钴胺胶囊的检测方法。

发明内容

发明目的：本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一种分离效果好，检测灵敏度高，稳定性好，可以客观、全面、准确的评价甲钴胺胶囊的质量，对控制甲钴胺胶囊剂的质量和保证疗效具有重要意义。

技术方案：为了实现以上目的，本发明所提供的甲钴胺胶囊的质量检测方法，包括以下步骤：

(1)甲钴胺标准品溶液的制备：避光条件下，取甲钴胺标准品，用体积比为25：85：400的甲醇-乙腈-pH7.0磷酸三乙胺缓冲液稀释成浓度为20μg/ml甲钴胺标准品的溶液，备用；

(2)甲钴胺胶囊样品溶液的制备：取甲钴胺胶囊内容物，研细，精密称取甲钴胺1mg，置50ml棕色量瓶中，用体积比为25：85：400的甲醇-乙腈-pH7.0磷酸三乙胺缓冲液稀释至刻度，摇匀，滤过，备用；

(3)标准曲线的制备：取步骤(1)得到的甲钴胺标准品溶液注入高效液相色谱仪制备标准曲线，色谱条件为：色谱柱：反相C₁₈柱；流动相：体积比为25：85：400的甲醇-乙腈-pH7.0磷酸三乙胺缓冲液；流速为0.8～1.0ml/min，检测波长为267~270nm，柱温为30℃；

(4)甲钴胺胶囊样品中甲钴胺的含量测定：精密吸取步骤(2)甲钴胺胶囊样品溶液20μl，注入高效液相色谱仪分析20分钟，色谱条件为：色谱柱：反相C₁₈柱；流动相：体积比为25：85：400的甲醇-乙腈-pH7.0磷酸三乙胺缓冲液；流速为0.8～1.0ml/min，检测波长为267~270nm，柱温为30℃；并按步骤(3)标准曲线测量甲钴胺胶囊中甲钴胺的含量。

作为优选方案，本发明提供的甲钴胺胶囊的质量检测方法，步骤(3)中以甲钴胺胶囊的峰面积为纵坐标，浓度μg/ml为横坐标，绘制标准曲线为：Y＝21.88X+2.88，r=0.99998。

作为优选方案，本发明所述的甲钴胺胶囊的质量检测方法，步骤(3)和(4)所述的流速为1.0ml/min，检测波长为267nm。

作为优选方案，以上所述的甲钴胺胶囊的质量检测方法，步骤(3)和(4)所述的高效液相色谱仪为安捷伦1200。

作为优选方案，本发明所述的甲钴胺胶囊的质量检测方法，步骤(3)和(4)所述的反相C₁₈柱为安捷伦Zorbax Extend反相C₁₈柱。

甲钴胺胶囊在加热或强光照射条件下，化学结构会发生变化会生成其它杂质，为了严格控制好甲钴胺胶囊的质量，制定检测甲钴胺胶囊含量的方法，本发明经过大量实验对流动相组成、流动相的洗脱程序、流速、检测波长及色谱柱进行筛选。

1、本发明针对甲钴胺成分，通过全波长扫描和3D等高线观察，确定甲钴胺在267nm处有较大的吸收，灵敏度高，因此本发明采用267nm作为检测波长，可以准确灵敏的检测到甲钴胺化合物。

2、甲钴铵容易电离成离子状态，导致分离和洗脱效果差，本发明根据甲钴铵化学性质，对流动相的组成进行了大量筛选，确定采用体积比为25：85：400的甲醇-乙腈-pH7.0磷酸三乙胺缓冲液作为流动相组成，本发明加入pH7.0磷酸三乙胺缓冲液，从而可以保证在色谱柱上达到很好的分离效果，不会出现峰重叠或拖尾现象，而且能保证在色谱柱上有很好的分离度。