[发明专利]全蝎药材中牛磺酸的含量测定方法

说明书

技术领域

    本发明涉及物质的含量测定，具体地说是一种全蝎药材中牛磺酸的含量测定方法。

背景技术

全蝎为钳蝎科动物东亚钳蝎(Buthus martensii Karsch)的干燥全体，主产于河南，山东，河北等地。全蝎具有熄风止痉、攻毒散结、通络止痛的功效，用于急慢惊风、中风面瘫、破伤风痉挛、疮疡肿毒、顽固性偏正头痛、风湿痹痛等证。临床应用较广，是一种较为贵重的中药。但由于其为动物药材，所含成分较为复杂，且分离困难，所以相关质量标准方面研究文献较少，《中国药典》2010版未见其含量测定方法，其它已公开发表的文献中一般对其中的氨基酸类成分进行定量研究，但方法繁琐，且需要衍生化才能测定，大大限制了测定方法的通用性。

牛磺酸为全蝎有效成分之一，是一种β-氨基酸，以游离的形式普遍存在于人体的各种组织中，属于非蛋白质氨基酸，具有消炎镇痛，解热抗惊厥作用。

在现有的公开资料中，牛磺酸含量测定的方法主要包括紫外法、薄层扫描法和HPLC法。其中紫外法在试验中要求加入甲醛与牛磺酸作用1小时后测定，且测定结果精密度、重复性不好；HPLC法需要对牛磺酸进行柱前衍生，所用的衍生试剂为2，4-二硝基氟苯，为一种剧毒化合物，且分析衍生化过程中对时间控制要求极严，操作起来比较困难。本发明采用薄层扫描的方法测定则过程相对简单，并经方法学验证，本发明方法线性、精密度、重复性、稳定性及加样回收率均符合要求，可作为全蝎药材的含量测定标准。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有测定技术存在的缺陷，提供一种操作简便、专属性强、精密度好、回收率高、测量结果准确的牛磺酸含量测定方法，可有效控制全蝎药材的质量，以确保全蝎药材制成品的原料品质。

为此，本发明采用如下的技术方案：全蝎药材中牛磺酸的含量测定方法，本发明采用采用薄层扫描法，其操作步骤如下：对照品溶液的制备，取牛磺酸对照品，加水制成对照品溶液；供试品溶液的制备，取全蝎药材粗粉，加水25ml，回流提取，提取液过滤，浓缩并定容为10ml，作为供试品溶液。分别吸取对照品和供试品溶液点于同一硅胶G薄层板上，并以正丁醇-冰醋酸-无水乙醇-水为展开剂展开，取出，晾干，以2％的茚三酮105℃下烘5分钟显色，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围以胶布固定，放置室温，薄层扫描仪下单波长扫描。

所述的全蝎药材中牛磺酸的含量测定方法，药材提取次数为2次，第一次1小时，第二次0.5小时。

所述的全蝎药材中牛磺酸的含量测定方法，所用展开剂正丁醇-冰醋酸-无水乙醇-水的体积比为4：6：0.5：1。

所述的全蝎药材中牛磺酸的含量测定方法，进行含量测定时扫描波长为500nm。

本发明采用的方法专属性强、精密度好，回收率高、测量结果正确，可有效控制全蝎药材的质量，确保了全蝎药材制成品的优质原料。

下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明，但本发明并不局限于这些实施例。

说明书附图：

图1为牛磺酸薄层显色图谱

图2为牛磺酸薄层扫描图谱

具体实施方式

所用仪器与试药：

    薄层扫描仪  CAMAG Scanner 3 Linomat 5半自动点样仪（瑞士卡玛公司）。

检测波长：500nm。

硅胶G预制板  青岛海洋化工厂；牛磺酸对照品（中国药品生物制品检定所）；其余试剂均为分析纯（国药集团上海试剂有限公司）。

线性试验

精密称定牛磺酸对照品11.25mg，加水定容至10ml，得浓度为1.125mg/ml的对照品溶液，分别精密吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5μl点于同一硅胶G薄层板上，并以正丁醇-冰醋酸-无水乙醇-水（4：6：0.5：1）展开，取出，晾干，以2％的茚三酮105℃下烘5分钟显色，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围以胶布固定，放置室温，500nm波长下扫描，以点样量x为横坐标，以峰面积积分值y为纵坐标，进行线性回归，见表1。

表1 牛磺酸含量测定标准曲线（n＝5）