[发明专利]一种高生物活性灵芝孢子油及其超临界制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种高生物活性的灵芝孢子油，属于中药领域。还涉及灵芝孢子粉的高能纳米冲击磨破壁方法及该灵芝孢子油的超临界CO2提取和分子蒸馏纯化的制备方法。

背景技术：

灵芝孢子是灵芝的有性生殖细胞，含有灵芝的全部遗传活性物质，具有抗肿瘤、降血糖和免疫调节等作用，在药理和临床上都有应用，也是一种良好的天然保健品原材料。灵芝孢子含有丰富的多糖、三萜类化合物、多肽、核酸、有机锗等抗肿瘤物质，而灵芝三萜类化合物是抗肿瘤的主要功能成分。灵芝三萜类化合物存在于灵芝孢子油中，具有广泛的生理和药理活性，它的开发与应用具有广阔的市场前景。但是灵芝孢子壁有两层，内部含有1-2个油滴，外壁是由一层坚硬的几丁质壳、不溶性纤维和木质素组成，有很强的耐酸碱性，阻止了溶剂对灵芝孢子油的提取。

灵芝三萜类化合物存在于灵芝孢子油，是灵芝孢子的主要功能成分，灵芝孢子破壁是灵芝孢子相关产品的必经工序。目前灵芝孢子油的提取方法多采用酸碱法，酶法，缺陷是灵芝孢子破壁率低，灵芝孢子油得率低，同时还会破坏灵芝孢子油的三萜类等有效成分；此外，还有微波法、超声波法、液氮淬冷法，这些方法虽然能提高灵芝孢子油得率，但是加工效率低，成本高，仅适用于实验室操作，难以实现工业化生产。

另外，灵芝孢子油极易氧化酸败。在湿度大，与空气接触时，破壁灵芝孢子粉在2-4天内就会氧化酸败，过氧化值超过60mmol/kg，酸价超过30mgKOH/kg，大大超出国家植物油脂的标准，失去营养价值。而有些专利采用挤压膨化技术，膨化温度达到80℃以上，破壁后孢子粉内的脂类物质暴露在空气中，存在氧化哈败的情况。膨化前用水将食用粉和灵芝孢子粉混合，干燥过程会加速灵芝孢子粉的氧化酸败。灵芝孢子油在低温下易结晶，达不到国家食用油的冷冻透明实验要求(＞5.5h)，影响产品外观，目前还没有专利改善这一状况。

为了克服以上缺点，需要寻找更加合理高效的灵芝孢子粉破壁方法和灵芝孢子油的制备方法，进一步优化生产工艺，既提高灵芝孢子油中有效成分的含量和纯度，又保护其不被破坏，提高油脂得率，并减少能耗，提高效率，进行规模化生产。

发明内容：

本发明的目的是公开一种高生物活性灵芝孢子油及其制备方法，属中药领域。该方法采用高能纳米冲击磨将灵芝孢子粉破壁，再结合超临界CO₂萃取和分子蒸馏纯化的制备方法。本方法操作过程在无水环境中进行，减少了孢子油在加工过程中的氧化现象，得到的产品性质稳定。采用该方法制得的灵芝孢子油冷冻透明试验时间超过5.5小时；测定不饱和脂肪酸组成在60-80％之间，总三萜含量在2-3％，总麦角甾醇含量2-4mg/g，灵芝酸A含量大于1mg/g，过氧化值低于5mmol/kg，酸价低于10mg KOH/g。

技术方案：

一种高生物活性灵芝孢子油制备过程见图1，工艺要点如下：

A精选灵芝孢子粉在50℃干燥8h以上，然后放入高能纳米冲击磨破壁，得破壁灵芝孢子粉。

B破壁后的灵芝孢子粉添加食用粉或糊精干法制粒。

C将灵芝孢子粉颗粒放置于CO₂萃取釜中，加入夹带剂，进行超临界萃取。

D从萃取釜中取出萃取物，经分子蒸馏除去水分及其他杂质，得到精制灵芝孢子油。

具体地讲，

步骤A中灵芝孢子粉是采用高能纳米冲击磨破壁至230nm左右得到破壁灵芝孢子粉；

步骤B中破壁的灵芝孢子粉添加1-5％的食用粉或糊精，然后采用干法制粒，制得5-20目的颗粒；

步骤C中进行超临界CO₂萃取时，以底层和上层加滤纸及中间层夹脱脂棉放入萃取釜中的滤板处，防止孢子粉进入萃取釜中。萃取压力25-40MPa，温度35-45℃，萃取1-2小时，再加入水或乙醇作为夹带剂，继续萃取1-2小时；分离釜I中分离压力8-9MPa，温度40-50℃；分离釜II中分离压力5-7MPa，温度30-40℃。

步骤D的具体过程是放出萃取物，经分子蒸馏进一步纯化，蒸馏温度150-180℃，转速120-200r/min，进样速率1-4ml/min，得到精制灵芝孢子油。

本发明具有以下优点：

1.灵芝孢子粉在50℃下干燥8h以上再进行粉碎，可有效减少灵芝孢子粉分离时的损失达5％以上。

2.优化了破壁工艺，采用磨介大珠中珠小珠比为1∶1∶1，孢子粉与磨介比为1∶1-1∶3，得到的灵芝孢子粉采用X射线小角散射测定，平均粒径达到230纳米，小于传统的破壁方法。