[发明专利]一种复方a 酮酸片中赖氨酸的含量检测方法无效
| 申请号: | 201210563767.6 | 申请日: | 2012-12-21 |
| 公开(公告)号: | CN103048407A | 公开(公告)日: | 2013-04-17 |
| 发明(设计)人: | 叶湘武;付爱玲;邱永锋 | 申请(专利权)人: | 上海景峰制药股份有限公司 |
| 主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
| 代理公司: | 上海天翔知识产权代理有限公司 31224 | 代理人: | 吕伴 |
| 地址: | 200120*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 复方 片中 赖氨酸 含量 检测 方法 | ||
1.一种复方a酮酸片中赖氨酸的含量检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)硼酸缓冲溶液的配制
0.4mol/L硼酸缓冲溶液的配制:取硼酸和氢氧化钠,加水使溶解并稀释制,然后用碱溶液调pH至10.10~10.30;
(2)邻苯二甲醛反应液的配制:
称取邻苯二甲醛适量,加甲醇或乙醇溶解定容,配制成100mg/ml的邻苯二甲醛储备液;吸取邻苯二甲醛储备液适量,加入2%~3%(v/v)的3-巯基丙酸混合均匀后用硼酸缓冲液稀释,配制成邻苯二甲醛浓度为10mg/ml的反应液;
(3)样品溶液的测定:
在可使用自动柱前衍生的高效液相色谱仪下,按如下进样程序对赖氨酸样品进行柱前衍生,并在338nm处对衍生物进行测定:
a:200μL/min的速度吸取硼酸缓冲液2.5μL;
b:200μL/min速度吸取赖氨酸样品液1μL;
c:在空气中以最大速度将硼酸缓冲液和赖氨酸样品液进行混合得第一混合液;
d:等待0.2min;
e:90μL/min的速度吸取纯化水进行洗针;
f:最大速度吸取OPA反应液0.5~2μL;
g:在空气中以最大速度将第一混合液和OPA反应液混合;
h:进样。
2.如权利要求1所述的复方a酮酸片中赖氨酸的含量检测方法,其特征在于,步骤(1)中的硼酸缓冲液pH值为10.20。
3.如权利要求1所述的复方a酮酸片中赖氨酸的含量检测方法,其特征在于,步骤(2)中的3-巯基丙酸的体积浓度为2%(v/v)。
4.如权利要求1所述的复方a酮酸片中赖氨酸的含量检测方法,其特征在于,步骤(3)的步骤(b)中的赖氨酸样品液浓度为0.6~0.01mg/ml。
5.如权利要求1所述的复方a酮酸片中赖氨酸的含量检测方法,其特征在于,步骤(3)中OPA的吸取量为1μL,即与赖氨酸样品液的体积比为1∶1。
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