[发明专利]一种在硬水中养殖雨生红球藻的方法无效
申请号: | 201210560096.8 | 申请日: | 2012-12-21 |
公开(公告)号: | CN102978120A | 公开(公告)日: | 2013-03-20 |
发明(设计)人: | 徐青山;骆其君;严小军;谭应宏;陈海敏 | 申请(专利权)人: | 丽江程海保尔生物开发有限公司 |
主分类号: | C12N1/12 | 分类号: | C12N1/12;C12R1/89 |
代理公司: | 昆明正原专利商标代理有限公司 53100 | 代理人: | 陈左 |
地址: | 674202 云南省*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 水中 养殖 雨生红球藻 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种在硬水中养殖雨生红球藻的方法。
背景技术
我国养殖螺旋藻等淡水微藻的主要基地是在云南省程海地区,作为水源的程海湖,水质偏碱性、硬度大,其中Ca2+溶液浓度 0.3-0.7 g/L,Mg2+浓度为0.25 g/L以上,pH为7.2-8.5,水的硬度大于0.55 g/L。这样的水质条件非常适宜养殖螺旋藻。由于螺旋藻为喜高温种类,低温时期生长缓慢,螺旋藻养殖一般在每年的3月份到11月份,因此,每年有4个月由于温度低的原因,不宜于养殖螺旋藻。此时养殖雨生红球藻比较适宜,而雨生红球藻养殖在硬水中生长率低下,迄今为止还没有直接利用硬水养殖雨生红球藻的研究与成功的案例。
目前已经有硬水的预处理的方法报道,如公开号为CN101157504 的发明专利“利用尾气中SO2、CO2软化硬水的工艺”,就公开了含SO2、CO2尾气与硬水在吸收塔中反应,混合液pH为2.5-5.5时,停止反应,用碱液调整pH值为6.5-7.5,过滤得软化水。又如公开号为CN1915865的发明专利“一种硬水软化剂”,就公开了一种处理硬水的硬水软化剂。它是由碳酸钠5%~15%,明矾5%~15%,聚合氯化铝0.5%~15%,具有pH调节,氧化还原,絮凝沉降的综合作用而软化硬水。还有如公开号为CN1076916的发明专利“硬水软化器再生养护增效催化剂”,就公开了由乙二氨乙醚基纤维素、羧甲基纤维素钠,乙二胺四乙酸等物质组成一种药物组合,能降低该反应的活化能,提高硬水软化器的再生效率。
通过水处理等技术措施将实现雨生红球藻与螺旋藻的轮换养殖,即高温时期养殖螺旋藻,低温时期养殖雨生红球藻,有利于促进生产设备、人员的高效化,从而提高整个生产效益。
发明内容
针对上述硬水中养殖雨生红球藻的不足,本发明目的是提供一种在硬水中养殖雨生红球藻的方法,本方法是以硬水作为培养液的前提下,规模化养殖雨生红球藻的方法。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为:
a、对硬水进行软化处理
即直接软化硬水的物理处理法,在自来水中加入褐藻酸钠,配制成体积浓度5%的褐藻酸钠溶液,煮沸3 min,待液体冷却成胶体后,放置在300目的筛绢中,悬挂在需要处理的水体中至少12小时,利用褐藻酸钠吸附Ca2+和Mg2+,得到初步软化的培养液,Ca2+溶液浓度降低20-50%,Mg2+浓度降低至少25%。
b、诱变及驯化藻种
采用处于指数生长期的雨生红球藻的藻液100 mL,离心弃部分上清液使藻液细胞密度每毫升在106个细胞,注入化学诱变剂甲基磺酸乙酯EMS,使雨生红球藻藻液中的EMS最终浓度为 0.3%—0.5%;36℃黑暗条件下处理1小时;4500 rpm离心去除诱变剂EMS,用a步骤得到的初步软化培养液洗涤2次,在24空板中加入初步软化的培养液,并在培养液中加入105个诱变后的细胞;观察生长情况,反复进行,得到生长迅速的藻种;在生长良好的空板中筛选藻种,继续在a步骤获得的培养液驯化,重复进行3个月,获得能够适应部分软化后硬水的藻种;
c、改变培养液的配方
采用间接软化的步骤,利用偏磷酸或正磷酸代替磷酸盐,以降低培养液中的Ca2+和Mg2+离子浓度,同时降低水体的pH值到8.0;利用多聚偏磷酸根离子可以与Ca2+、Mg2+离子形成配合物,在大池培养采用浓度40克/吨的硝酸铵作为氮源,浓度3-5克/吨的偏磷酸或正磷酸作为磷源;
d、改变接种策略,增大雨生红球藻接种量,提高藻种与培养液的比例,采用的比例是按体积重量藻种与培养液的比例为1/4—1/2,按照生长状态,观察藻液呈上浮状态,并分批添加培养液。
本发明与现有技术相比的优点在于:本发明适合于在硬水中大规模养殖雨生红球藻,具有投资小、方便操作的特点,能够充分利用养殖设施的基本功能,降低了生产成本,提高养殖的效率。
具体实施方式
实施例1
一种在硬水中养殖雨生红球藻的方法,按如下步骤进行:
①直接对硬水进行软化
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