[发明专利]单核细胞趋化蛋白2作为结核性胸水检测的标志物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及医学和诊断领域。更具体地说，本发明涉及一种可用于检测结核的胸水标记物及其用途。

背景技术

目前，结核病仍是全球发病率及死亡率最高的感染性疾病。结核性胸膜炎(Tuberculosis Pleuritis,TP)是机体处于高敏状态，对结核菌及其代谢产物在胸膜出现的炎症反应，是原发或继发结核累及胸膜的结果。TP是肺外结核中是最常见的结核感染形式之一，仅次于淋巴结结核。结核病人中大约有5%会发生TP，其往往呈急性发病，约1/3的患者在1周内出现症状，2/3的患者在1个月内出现症状。最常见的症状是胸膜性疼痛(75%)、干咳(70%)。典型TP的临床特征为单侧胸腔少到中等量的积液，即结核性胸腔积液(Tuberculosis PleuralEffusions,TPE)。

TP如未经治疗，其自然病程一般为4～16周，其中有43%到65%的病例会在若干年后发展为活动性肺结核或肺外结核。因此正确诊断与治疗TP很重要。目前，治疗方法主要为抗结核药治疗，另外辅以糖皮质激素及胸水抽吸或引流。TP的确诊需要在痰、胸水或胸膜活检中鉴定出结核分枝杆菌。影像学手段及胸腔镜均有助于诊断TPE。此外，支持诊断的依据还包括行胸腔穿刺进行胸水检查。胸水检查包括常规的理化特性检查(颜色、PH值、葡萄糖浓度等)、胸水涂片与培养、腺苷脱氨酶(ADA)检测。胸水涂片与培养因其检出率低、检测周期长有很大的局限性。ADA检测成本低、创伤小、方便快捷，如果胸水中ADA含量>70IU/L则高度提示结核，反之，如果<40IU/L则可以基本上可以排除结核，其敏感度可高达95%，因此被广泛采用于TPE的辅助诊断，但是由于某些淋巴细胞丰富的胸水如：类风湿性关节炎、支气管肺泡癌、间皮瘤、支原体和衣原体性肺炎、肺吸虫病、球孢子菌病等胸水ADA往往也会增高，因此该检测方法的特异度仍存在不足，为此，ADA检测结果的分析应该结合临床所见以及常规检验结果。

随着细胞生物学与分子生物学的进展，胸液积液的免疫学检查受到关注。胸膜腔的炎症导致胸膜血管通透性的增加，从而产生富含蛋白和细胞的渗出性胸腔积液。结核性胸膜炎和恶性胸腔积液是导致淋巴细胞性胸腔积液(胸腔积液中淋巴细胞数量占白细胞总数的50%以上)的常见病因，CD4⁺T淋巴细胞在此过程中占居主导地位。结核性胸膜炎以Th1反应为主，恶性胸腔积液以Th2反应为主。Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-13等，刺激B细胞产生IgE和其它抗体参与过敏反应；而Th1细胞主要分泌IFN-γ和IL-2，通过激活巨噬细胞和细胞毒性T细胞在抗胞内病原体感染中发挥重要作用。结核分枝杆菌的感染是一个复杂的免疫反应的过程，CD4⁺、CD8⁺效应性T细胞是参与结核性胸膜炎防御反应的重要效应细胞，可通过分泌特异性IFN-γ介导免疫应答。因此，结核性胸腔积液中表达高水平的IFN-γ，测定TPE中IFN-γ浓度有助于诊断结核性胸膜炎，该检测方法具有较高的灵敏度和特异度，但其诊断价值仍存有争议。研究发现，病变部位还存在招募淋巴细胞的趋化因子，如巨噬细胞炎症蛋白1-α(MIP1-α)、干扰素诱导蛋白-10、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)。这些趋化因子可能介导选择性募集淋巴细胞到胸腔积液中。虽然，某些细胞因子如IL-2、TNF-α、IL-1β及趋化因子如IP-10、MCP-1在结核性胸腔积液中的表达水平及诊断价值有零星报道，但是目前尚缺乏对胸腔积液中免疫细胞及免疫分子的系统分析，因此，尚未发现优于IFN-γ的新诊断标志物。

因此，本领域急需对结核病具备鉴别诊断意义的标志物以及检测该标志物进而诊断结核病的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种鉴别诊断结核性胸水的标志物及其在制备结核性胸水鉴别诊断试剂或试剂盒中的用途。

本发明的另一目的是提供鉴别诊断结核性胸水的检测试剂盒以及检测或诊断结核性胸水的方法。

在第一方面，本发明提供MCP-2/CCL8蛋白在制备检测结核性胸水的试剂盒或检测试剂中的用途。

在优选的实施方式中，所述检测试剂是MCP-2/CCL8蛋白的特异性抗体。

在优选的实施方式中，所述检测试剂是带有或不带有检测标记的单克隆抗体、多克隆抗体或抗血清，或蛋白芯片。

在进一步的优选实施方式中，所述可检测标记选自下组：生色团、化学发光基团、荧光团、同位素或酶。

在第二方面，本发明提供MCP-2/CCL8蛋白作为结核性胸水检测标志物的用途。