[发明专利]一种蓝莓花色苷的制备方法与所制备的蓝莓花色苷的应用

说明书

技术领域

本发明属于营养与免疫领域，涉及蓝莓花色苷，尤其是一种蓝莓花色苷的制备方法与所制备的蓝莓花色苷的应用。 

背景技术

随着大气臭氧层的破坏和人类生活方式改变，日光照射增加使皮肤癌发病率显著增加。紫外线作用于细胞后，其光子能量被原子或分子吸收，引起分子原子电子能级状态的改变，进而导致细胞内相关事件出现，如细胞DNA损伤、基因表达的改变、细胞周期进程的抑制、DNA-蛋白交联以及染色体畸变；影响并抑制皮肤免疫功能，使突变细胞容易逃脱机体的免疫监视，从而易于导致皮肤鳞癌和基底细胞癌的发生。 

蓝莓(Blueberry)又称越橘，浆果，属杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vacciniumlspp)多年生落叶或常绿灌木。蓝莓原产于美国佛罗里达北部。蓝莓果实呈蓝色，近圆形，披一层白色果粉，果肉细腻，种子极小，甜酸适度，且具有清爽的香气，既可鲜食，又可加工成果汁饮料、果酒、糖果、小食品等。其果实中含有丰富的VC、VE、VA)、叶酸、鞣质，大量的糖、果胶、钾离子、氨基酸等。此外，蓝莓果内含有多种活性物质，如原花青素、花色苷、黄酮醇、酚酸等，蓝莓是一类含花色苷极高的资源。其花色苷被认为是自然界最有效的抗氧化剂。 

花色苷一词是Marguart在1835年首先用来命名矢车菊花朵中的蓝色提取物时提出来的，现为同类物质的总称。花色苷具有黄酮类化合物的C6-C3-C6碳结构，即两个芳香环和一个含氧杂环，在植物中通过与黄酮类相同的生物合成途径形成。花青素作为花色苷的前体物质，其基本结构为3，5，7-三羟基-2-苯基苯并吡喃，即花色基元，花色基元与各种糖结合形成不同的配糖体。由于花青素不稳定，所以在植物中主要以花色苷形式存在。现已知的花色素有飞燕草色素、矢车菊色素、天竺葵素，以及甲基化的芍药色素、锦葵色素、牵牛花色素等。大量的研究结果也表明花色苷是一类具有保健功能的活性成分，有很好的药理作用： 抗氧化、抗突变、抗肿瘤、清除自由基、减少低密度脂蛋白、改善视力、保护肝脏、预防心脑血管疾病、抗菌及抗癌等功能。目前，花色苷已成为医药、保健品的重要原料，以及食品、化妆品的重要添加剂。此外，还有许多研究证明花色苷在分子水平上花色苷可能通过保护DNA结构稳定，抑制细胞中部分酶活性，促进部分激素的形成和分泌来达到改善人体其它机能。 

通过检索，未发现与本专利申请相关的专利公开文献。 

发明内容

本应用的目的在于克服现有技术的不足，提供一种原料来源广泛、价格低廉、方法简单的蓝莓花色苷的制备方法，同时也提供了由该制备方法制备得到的蓝莓花色苷的应用。 

本发明实现目的的技术方案是： 

一种蓝莓花色苷的制备方法，步骤如下： 

⑴蓝莓花色苷的提取 

将蓝莓冻干后捣碎、过筛后，将蓝莓粉与乙醇按蓝莓粉和乙醇的料液比g/g为1:8~12混合，混合物在85℃条件下提取、过滤，按上述重复提取2次，合并滤液，得到蓝莓花色苷粗提液； 

⑵蓝莓花色苷的纯化 

将步骤⑴中制得的蓝莓花色苷粗提液于3000 r/min离心10 min，上清液抽滤，将滤液经浓缩、纯化后得洗脱液，洗脱液经过萃取，真空冷冻干燥即得蓝莓花色苷。 

而且，所述步骤⑴中与蓝莓粉混合的乙醇的浓度为80%。 

而且，所述步骤⑴中混合物在85℃条件下提取时间为3 h。 

而且，所述步骤⑴中蓝莓粉和乙醇的料液比g/g为1:10。 

而且，所述步骤⑵中的纯化树脂为AB-8大孔树脂，纯化条件为：吸附平衡时间为4 h，解吸平衡时间为2 h，吸附平衡质量浓度为750 mg/L，在30℃，用pH3.0的60%乙醇溶液作为解吸液，吸附流速为l mL/min，上样液浓度为3.0 mg/mL，用5倍柱床体积的60%酸性乙醇作为洗脱液，洗脱流速为l mL/min。  

而且，所述步骤⑵中的萃取液为石油醚。 

一种如上所述的蓝莓花色苷的制备方法所制备得到的蓝莓花色苷在制备保护DNA损伤的药物中的应用。 

而且，所述DNA损伤为紫外照射造成肝癌细胞的损伤。 

而且，所述蓝莓花色苷的作用浓度为75 μg/mL。 

本发明的优点和有益效果为：  

1、本发明制备方法是通过有机溶剂提取法得到蓝莓花色苷粗提液，再经过离心，抽滤，浓缩，树脂纯，再经过真空冷冻干燥得蓝莓花色苷样品，制备方法方法简单，蓝莓花色苷的利率高。