[发明专利]一种固定化酶法制备高F值紫苏低聚肽的方法无效
| 申请号: | 201210557777.9 | 申请日: | 2012-12-20 |
| 公开(公告)号: | CN103060408A | 公开(公告)日: | 2013-04-24 |
| 发明(设计)人: | 江连洲;李杨;齐宝坤;冯红霞;王欢;曹亮 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
| 主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/14;C11B1/00;C11B1/04 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 150030 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 固定 法制 紫苏 低聚肽 方法 | ||
1.一种固定化酶法制备高F值紫苏低聚肽的方法,其特征在于所述方法步骤如下:
步骤一:对紫苏子脱壳粉碎,与水混合得到混合液,所述加水量为物料质量的6倍;
步骤二:将步骤一中所得混合液放入装有固定化Alcalase2.4L碱性蛋白酶的连续搅拌罐反应器中,反应3h后流出产物进行离心,分离出紫苏油、多肽液及残渣;
步骤三:将步骤二收集的多肽液放入装有固定化木瓜蛋白酶连续搅拌罐反应器,反应2h后流出产物进行灭酶,高速离心分离出混合液;
步骤四:将步骤三中的混合液加入一定量的活性炭,吸附除去芳香族氨基酸,经超滤脱盐得到高F值的紫苏低聚肽。
2.根据权利要求1所述的一种固定化酶法制备高F值紫苏低聚肽的方法,其特征在于所述步骤一中紫苏子的粉碎粒度在60-90目。
3.根据权利要求1所述的一种固定化酶法制备高F值紫苏低聚肽的方法,其特征在于所述步骤二中固定化Alcalase2.4L碱性蛋白酶由3%壳聚糖、0.5%戊二醛经交联-吸附法交联时间4h后,调pH=9在给酶量950u/g的载体上固定化8h制得,其添加量为底物浓度的0.5-3%,温度40-60℃,pH=7.5-9.5,灭酶条件为灭酶条件为沸水中加热5min,离心条件为转速4500rpm,温度4℃,时间20min。
4.根据权利要求1所述的一种固定化酶法制备高F值紫苏低聚肽的方法,其特征在于所述步骤三中固定化木瓜蛋白酶的制备方法同Alcalase2.4L,添加量为底物浓度的0.5-3%,温度40-60℃,pH=7.5-9.5,灭酶条件为灭酶条件为沸水中加热5min,离心条件为转速4500rpm,温度4℃,时间20min。
5. 根据权利要求1所述的一种固定化酶法制备高F值紫苏低聚肽的方法,其特征在于所述步骤四中活性炭添加量为底物质量的5-15倍,pH=2-5,温度为25-50℃,超滤膜孔径为2-8微米,截留分子量在100-1000,操作压差在1-2.5MPa。
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