[发明专利]利用酶生产虾青素的方法

权利要求书

1.一种利用酶生产虾青素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）康氏木霉的培养：将康氏木霉孢子悬浮液接入PDY液体培养基中，培养1.5-2.5d，离心去上清液，得康氏木霉菌菌泥；

（2）康氏木霉发酵物的培养：取步骤（1）所得的康氏木霉菌菌泥接入固体发酵培养基中，先于30-32℃下培养29-31h，后于26-28℃下培养75-90h，离心去上清液，得康氏木霉发酵物；

（3）雨生红球藻的扩培：将雨生红球藻接入BBM培养基并置于封闭式光生物反应器中，通空气培养1.5-2.5d，离心去上清液，得雨生红球藻藻泥；

（4）富集虾青素的雨生红球藻藻粉的制备：将步骤（3）所得的雨生红球藻藻泥接入BBM培养基中，通入CO₂，通气量为0.5～1.5L/(L·min)并于32-35℃培养2-3d，离心去上清液，冷冻干燥得富集虾青素的雨生红球藻藻粉；

（5）虾青素干粉的制备：将步骤（2）所得的康氏木霉发酵物和步骤（4）所得的富集虾青素的雨生红球藻藻粉混合，匀质，离心，过滤取固体相，冷冻干燥，得虾青素干粉；

（6）虾青素的萃取：用玉米油萃取步骤（5）所得的富含虾青素的干粉，即可得虾青素。

2.根据权利要求1所述的酶生产虾青素的方法，其特征在于，步骤（1）所述的PDY液体培养基的组成及重量份配比如下：马铃薯18-22wt%，葡萄糖1.5-2.5wt%，酵母膏0.8-1.2wt%，余量为水。

3.根据权利要求1所述的酶生产虾青素的方法，其特征在于，步骤（1）所述的康氏木霉孢子悬浮液接入量为：康氏木霉孢子悬浮液与PDY液体培养基的重量份配比为1：9-11，所述康氏木霉孢子悬浮液中康氏木霉孢子的浓度为0.04-0.06mg/L，所述的培养条件为温度23-27℃、转速120-150r/min。

4.根据权利要求1所述的酶生产虾青素的方法，其特征在于，步骤（2）所述的康氏木霉菌菌泥的接入量为：康氏木霉菌菌泥与固体发酵培养基的重量份配比为1：490-560。

5.根据权利要求1所述的酶生产虾青素的方法，其特征在于，步骤（2）所述的固体发酵培养基的组成及重量份配如下：豆粕0.9-1.1份、稻草11-13份、麸皮9-11份、羧甲基纤维素钠0.75-0.85份、吐温-800.009-0.011份、（NH₄）₂SO₄0.07-0.09份、水28-30份。

6.根据权利要求1所述的酶生产虾青素的方法，其特征在于，步骤（3）所述的封闭式光生物反应器的参数为：温度25-28℃，光照55-65μmol·m^-2·s^-1。

7.根据权利要求1所述的酶生产虾青素的方法，其特征在于，步骤（3）所述的BBM培养基的组成及重量份配比如下：硝酸钠245-255份，磷酸二氢钾170-180份，磷酸氢二钾70-80份，七水硫酸镁70-80份，二水氯化钙23-38份，氯化钠23-38份，EDTA48-53份，氢氧化钾29-33份，七水硫酸亚铁4.8-5份，硼酸11-12份，七水硫化锌8.5-9份，氯化锰1.4-1.5份，氧化钼0.7-0.8份，五水硫酸铜1.5-1.6份，六水硝酸钴0.7-0.8份，蒸馏水1000ml。

8.根据权利要求1所述的酶生产虾青素的方法，其特征在于，步骤（3）所述的雨生红球藻的接入量为：每100mL BBM培养基中接入雨生红球藻3-5g。

9.根据权利要求1所述的酶生产虾青素的方法，其特征在于，步骤（4）所述的BBM培养基的组成及重量份配比如下：七水硫酸镁70-80份，二水氯化钙23-38份，氯化钠23-38份，EDTA48-53份，氢氧化钾29-33份，七水硫酸亚铁4.8-5份，硼酸11-12份，七水硫化锌8.5-9份，氯化锰1.4-1.5份，氧化钼0.7-0.8份，五水硫酸铜1.5-1.6份，蒸馏水1000ml。

10.根据权利要求1所述的酶生产虾青素的方法，其特征在于，步骤（4）所述的雨生红球藻藻泥的接入量为：每100mL BBM培养基中接入雨生红球藻藻泥20-25g。