[发明专利]一种pH敏感性萝卜硫素壳聚糖微球的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于药物载体的制备方法，具体涉及一种pH敏感性萝卜硫素壳聚糖微球的制备方法。

背景技术

萝卜硫素（sulforaphane）又称“莱菔硫烷”，是葡萄糖萝卜硫苷(glucoraphanin)经黑芥子酶(EC 3.2.3.1)酶解或酸水解后产生的。它是迄今为止蔬菜中发现的最强的抑癌活性物。萝卜硫素就其化学成分而言，为异硫氰酸酯类化合物，易溶于水，相对分子质量177.3，分子式C₆H₁₁S₂NO，结构式如下：

它是一种多功能诱导物，可诱导机体产生Ⅱ型解毒酶——谷胱甘肽转移酶和醌还原酶，此酶可对许多致癌物产生抗性，从而起到抗癌作用。另外，萝卜硫素还具有抑制DNA去乙酰化酶的能力。近年来，随着癌症的发病率的逐渐上升，萝卜硫素作为一种具有较强的抗癌作用的植物活性物质，有着广阔的研究价值及市场前景。

虽然萝卜硫素具有很好的抗癌作用，但是该化合物却不稳定，在常温下易氧化降解。本发明以壳聚糖为载体，将萝卜硫素微球化，制成缓释制剂。壳聚糖是带氨基的多糖，无毒，生物相容性好，其氨基质子化后能与多价阴离子发生静电作用而凝聚。三聚磷酸钠无毒，可作为壳聚糖的离子交联剂，且不与萝卜硫素发生化学反应。以三聚磷酸钠交联壳聚糖得到具有pH敏感性的负载萝卜硫素的纳米粒，可以提高萝卜硫素稳定性，并且延长有效成分的作用时间，提高萝卜硫素的生物利用率，更好的发挥其作用，有着重要的意义。

现有技术中尚未有以壳聚糖为载体，三聚磷酸钠为交联剂制备pH敏感性的萝卜硫素-壳聚糖微球的报告。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种pH敏感性萝卜硫素壳聚糖微球的制备方法的技术方案。

所述的一种pH敏感性萝卜硫素壳聚糖微球的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

 1）将壳聚糖粉末溶于乙酸溶液中，使溶液中壳聚糖的最终浓度达到0.5～5.5mg/ml，调节上述溶液的pH值至4.8～6.2，再依次经80～100μm滤纸和0.15～0.55μm滤膜过滤；

2）取浓度为10～40mg/ml萝卜硫素水溶液，加入到步骤1）制得的壳聚糖乙酸溶液中，使得溶液中萝卜硫素与壳聚糖的最终质量比为1:1～4；

3）在10～30℃、100～400rpm转速下，用7号针头将0.4～0.8mg/ml的三聚磷酸钠溶液滴入步骤2）得到的混合液中，滴加速度为1～5滴/秒，使得溶液中三聚磷酸钠与壳聚糖的最终质量比为1:4～7，继续搅拌1～1.5小时，即得到萝卜硫素-壳聚糖微球。

所述的一种pH敏感性萝卜硫素壳聚糖微球的制备方法，其特征在于所述的步骤1）中壳聚糖粉末脱乙酰度为90～95%。

所述的一种pH敏感性萝卜硫素壳聚糖微球的制备方法，其特征在于所述的步骤1）中乙酸溶液的浓度为1～5%。

所述的一种pH敏感性萝卜硫素壳聚糖微球的制备方法，其特征在于所述的步骤1）中壳聚糖的最终浓度达到1～3.5mg/ml。

所述的一种pH敏感性萝卜硫素壳聚糖微球的制备方法，其特征在于所述的步骤1）中溶液的pH值至5.2～5.8。

所述的一种pH敏感性萝卜硫素壳聚糖微球的制备方法，其特征在于所述的步骤2）中萝卜硫素水溶液浓度为20～30mg/ml。

所述的一种pH敏感性萝卜硫素壳聚糖微球的制备方法，其特征在于所述的步骤2）中萝卜硫素与壳聚糖的最终质量比为1:2～3。

所述的一种pH敏感性萝卜硫素壳聚糖微球的制备方法，其特征在于所述的步骤3）中三聚磷酸钠与壳聚糖的最终质量比为1:4～5。

所述的一种pH敏感性萝卜硫素壳聚糖微球的制备方法，其特征在于所述的步骤3）中三聚磷酸钠溶液滴加速度为1～3滴/秒。

所述的一种pH敏感性萝卜硫素壳聚糖微球的制备方法，其特征在于所述的步骤3）中在15～25℃、150～300rpm转速下，继续搅拌1～1.3小时。

上述的一种pH敏感性萝卜硫素壳聚糖微球的制备方法，设计合理，以壳聚糖为载体，三聚磷酸钠为交联剂，通过离子交联法制备得到微球，其实验简单温和，不需使用有机溶剂，安全环保，可成功制备平均粒径500nm的载药微球溶液，并且制得的微球溶液稳定性好，长时间放置粒径无太大变化，在酸性条件下，萝卜硫素更容易释放，pH值越大，缓释时间越长，是萝卜硫素的理想缓释剂型。