[发明专利]异养小球藻的选育方法

说明书

 

技术领域

本发明属于微藻培育技术领域，具体涉及异养小球藻的选育方法。

 

背景技术

小球藻细胞内含有丰富的叶绿素，属于单细胞绿藻，是真核生物。小球藻中富含CGF（小球藻生长因子），能迅速恢复机体造成的损伤，并可作为食品风味改良剂，广泛应用于食品及发酵领域。小球藻产于淡水或咸水。淡水种常生长在较肥沃的水体中，有时在潮湿土壤、岩石、树干上也能发现。在自然条件下水体中的个体不多，但在人工培养条件下能大量生长繁殖，产量很高，蛋白质含量为干重的50%左右，还富含其他成分。现有培育小球藻的方法比较复杂，培育时间长，且藻细胞生物含量也不高。

 

发明内容

为了克服现有技术领域存在的上述缺陷，本发明的目的在于，提供一种异养小球藻的选育方法，解决现有技术培育小球藻的方法比较复杂，培育时间长，且藻细胞生物含量也不高的问题。

本发明提供的异养小球藻的选育方法，包括以下步骤：

（1）    调节培养液使其pH为7—8，120℃，0.10-0.18Mp高温灭菌30min；

（2）    取灭菌后的培养液100ml，加入1—2g琼脂溶解后灭菌，倒入灭过菌的培养皿，冷却凝固后，制成筛选平板；

（3）    取来自天然水体含有绿水的水样，经离心机离心后，倒去上清液，用无菌的培养液悬浮沉在离心管底部的细胞，然后再经过离心后，除去上清，经过3-5次重复，最后，将培养液加入离心管，使沿在底部的藻细胞悬浮，吸取藻细胞悬浮液2ml，均匀的涂在筛选平板表面，放在20-35℃的光照条件下培养，培养5-10天后，在平板表面长出绿色的单克隆藻体；

（4）    在无菌条件下，接种单克隆藻体于三角瓶中的无菌异养培养液中，进行无光培养，震荡转速为200r/min，温度为25℃，培养5天。

本发明提供的异养小球藻的选育方法，其有益效果在于，培养过程简单，培育时间短，藻细胞生物含量较高。

 

具体实施方式

下面结合一个实施例，对本发明提供的异养小球藻的选育方法进行详细的说明。

 

实施例

本实施例的异养小球藻的选育方法，包括以下步骤：

（1）    调节培养液使其pH为7—8，120℃，0.10-0.18Mp高温灭菌30min；

（2）    取灭菌后的培养液100ml，加入1—2g琼脂溶解后灭菌，倒入灭过菌的培养皿，冷却凝固后，制成筛选平板；

（3）    取来自天然水体含有绿水的水样，经离心机离心后，倒去上清液，用无菌的培养液悬浮沉在离心管底部的细胞，然后再经过离心后，除去上清，经过3-5次重复，最后，将培养液加入离心管，使沿在底部的藻细胞悬浮，吸取藻细胞悬浮液2ml，均匀的涂在筛选平板表面，放在20-35℃的光照条件下培养，培养5-10天后，在平板表面长出绿色的单克隆藻体；

（4）    在无菌条件下，接种单克隆藻体于三角瓶中的无菌异养培养液中，进行无光培养，震荡转速为200r/min，温度为25℃，培养5天，藻细胞生物量达到25g/L。