[发明专利]轮状病毒的环介导等温扩增检测试剂盒无效
申请号: | 201210553449.1 | 申请日: | 2012-12-18 |
公开(公告)号: | CN103014177A | 公开(公告)日: | 2013-04-03 |
发明(设计)人: | 寇晓霞;吴清平;薛亮;张菊梅 | 申请(专利权)人: | 广东省微生物研究所;广东环凯微生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 刘明星 |
地址: | 510070 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 轮状病毒 环介导 等温 扩增 检测 试剂盒 | ||
1.一种轮状病毒的检测试剂盒,包括RNA提取试剂,RNA反转录试剂,环介导等温扩增
试剂和检测引物组,其特征在于,所述的检测引物组由下列引物组成:
上游外引物F3:5’-ACCACTCCTTAATGCACAA-3’;
下游外引物B3:5’-GCCATCCTTTGATTAAAAATAGCT-3’;
上游内引物FIP:5’-CCTCTCGCGTTGAGTTCGTAT-GGAATAAATCTTCCGATTACTG G-3’;
下游内引物BIP:5’-ATGTTTGTATTACCCAACTGAAGCA-AGAAAGTGTATCCTTCCA TGAA-3’。
2.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述的环介导等温扩增试剂包括反应液A、反应液B和反应液C:
反应液A:每24μL含有2.5μL10×Thermopol反应缓冲液、1μl8U/μLBst DNA聚合酶、0.4μL10mmol/LdNTPs、0.5μL10μmol/L上游外引物F3、0.5μL10μmol/L下游外引物B3、1μL40μmol/L上游内引物FIP、1μL40μmol/L下游内引物BIP、0.6μL100mmol/L MgSO4、12.5μL2mol/L甜菜碱、4μL灭菌双蒸水ddH2O;
反应液B:50mM MgCl2;
反应液C:100×的荧光染料SYBR GreenⅠ。
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