[发明专利]一种基于适配体识别的鼠伤寒沙门氏菌可视化检测方法无效

专利信息
申请号: 201210552781.6 申请日: 2012-12-19
公开(公告)号: CN103014163A 公开(公告)日: 2013-04-03
发明(设计)人: 王周平;袁京磊;俞晔;段诺;吴世嘉;夏雨;马小媛 申请(专利权)人: 江南大学;中华人民共和国张家港出入境检验检疫局
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/10;C12Q1/06
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 214122 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 基于 适配体 识别 伤寒 沙门氏菌 可视化 检测 方法
【权利要求书】:

1.一种基于适配体识别的鼠伤寒沙门氏菌可视化检测方法,其步骤为: 

1)合成生物素和巯基修饰的鼠伤寒沙门氏菌适配体。 

2)制备纳米金 

3)制备纳米金-适配体探针 

4)亲和素包被酶标板. 

5)牛血清蛋白(BSA)封闭酶标板 

6)每孔加入10μL浓度为10-5M的生物素修饰的沙门氏菌适配体,37℃摇床30min。用1×PBS洗涤3次,拍干。 

7)每孔加入30μL的样品,37℃摇床30min。用1×PBS洗涤3次,拍干。 

8)每孔加入30μL的纳米金-适配体探针,37℃摇床30min。用1×PBS洗涤1次,拍干;再用0.02mol/L的PBN缓冲液(0.3mol/L NaNO3和10mmol/L Na2HPO4/NaH2PO4,pH 7)洗涤两次,每次3min,拍干,以除去微孔板中游离的纳米金探针。 

9)银增强显色 

10)酶标仪检测吸光度值。 

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