[发明专利]大米草总生物碱的超声微波提取法及其抑菌性能应用

说明书

技术领域

本发明涉及大米草提取物的制备方法及应用，特别是涉及大米草总生物碱的提取方法及以所述方法制备的大米草总生物碱在抑菌方面的应用。

背景技术

大米草属禾本科米草属，为多年生湿生草本宿根植物。大米草含有多种生物活性物质，如生物碱、氨基酸、维生素等，粗蛋白的含量较高，是一种营养成分比较齐全的植物。生物碱是自然界中广泛存在的一大类碱性含氮有机化合物，一些生物碱因其具有抗肿瘤、抗炎、抑菌、抗血小板凝集、抗心律失常以及抗高血压等心血管疾病的作用，使它在卫生、医药等方面有着巨大的应用潜力，近年来成为人们研究的热点。大米草生物碱可作为研制多糖类药物、保健饮品、食品添加剂等多种物质的原料。

文献检索中尚未见有大米草中总生物碱的提取以及其生物碱的应用报道。刘树兴等(刘树兴，郭瑞霞，赵芳，食品科学，2009，30(16)：52-55)采用超声波法提取荷叶中的生物碱，优化条件后生物碱的得率为0.17％。近年来，超声波提取以其特有的渗透细胞能力，可缩短提取时间，提高有效成分和药材的利用率，并且可以避免高温对提取成分的影响，成为提取中药领域的一种优良方法。申请号为201010289195.8的中国发明专利采用乙醇浸提的方法，在超声辅助作用下提取昆明山海棠总生物碱，该方法特征在于提取过程包含以下步骤：(1)昆明山海棠去皮根粉碎后过5-15目筛；(2)加昆明山海棠去皮根10-40倍量61-69％乙醇在超声条件下多次提取；(3)合并提取液，浓缩后加入30-45％的浓盐酸调节pH值至酸性，充分混合后过滤；(4)滤液用氯仿萃取3-5次，所得萃余相用Na₂CO₃调节pH值至9-11，再用氯仿萃取3-5次，合并萃取相；(5)40-50℃条件下，旋转蒸发萃取相回收氯仿后得总生物碱；或将上述所说的步骤(4)、(5)改为将滤液用氯仿萃取3-5次，所得萃余相用Na₂CO₃调节pH值至9-11，将该萃余相通过含C18的固相萃取(Solid-Phase-Extraction，SPE)装置，先用蒸馏水冲洗30分钟，再用30-45％乙醇冲洗，收集该冲洗液经旋转蒸发回收乙醇后得总生物碱。但由于不同植物在地理生长环境、科属种类间的差异，导致不同植物活性成份组成及含量方面存在差异，实际进行超声波操作条件不同，按照上述文献和发明专利对大米草总生物碱进行提取很难有效实施并获得满意效果。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种高效提取大米草总生物碱的方法，利用该方法提取的大米草总生物碱产率高，适合工业化生产。该方法包括以下步骤：

(1)新鲜大米草植株洗净，烘干，粉碎，得到大米草粉末；

(2)收集步骤(1)的粉末，加入到高浓度乙醇中，在超声波中浸提，抽滤；

(3)收集步骤(2)的滤液，将滤液转移到旋转蒸发仪中，旋转蒸发至浸膏；

(4)用柠檬酸溶解步骤(3)的浸膏，调节pH至酸性，再用无水碳酸钠调节pH至碱性，析出所需的大米草总生物碱沉淀物。

根据本发明方法的一个优选实施方案，其中步骤(1)所述的大米草粉末为20-80目。

根据本发明方法的一个优选实施方案，其中步骤(2)所述的大米草粉末和乙醇的料液比(w/v)为1∶10-1∶30。

根据本发明方法的一个优选实施方案，其中步骤(2)所述的高浓度乙醇为60-80％的乙醇。

根据本发明方法的一个优选实施方案，其中步骤(2)所述的超声浸提的时间为40-60min。

根据本发明方法的一个优选实施方案，其中步骤(3)所述的旋转蒸发的温度为30-40℃。

根据本发明方法的一个优选实施方案，其中步骤(4)所述的酸性条件是pH1-3，碱性条件是pH 9-11。

与现有技术相比，本发明的优点在于，采用超声波法提取，无污染，无毒害，操作条件温和，提取的总生物碱产率高。根据本发明的一个优选实施方案，其中大米草总生物碱产率为1.32％。

本发明的另一个目的是提供按上述方法提取的大米草生物碱在抑菌性方面的应用。在固体培养基上培养，用滤纸片法测定总生物碱提取液对大肠杆菌、铜绿假单胞菌、淀粉液化芽孢杆菌的抑菌性能。同时，用阿莫西林溶液做阳性对照，无水乙醇做阴性对照。

具体实施方式

以下实施例旨在进一步举例说明，但不限制本发明。

实施例1：大米草总生物碱的提取