[发明专利]具有抗肿瘤活性的黄蜀葵花多糖及其制备方法有效
申请号: | 201210551228.0 | 申请日: | 2012-12-18 |
公开(公告)号: | CN102964466A | 公开(公告)日: | 2013-03-13 |
发明(设计)人: | 刘志辉;李爽;王琼;祈明浩;钱芳;陆超;严海兵 | 申请(专利权)人: | 江苏省中医院 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61K31/715;A61P35/00 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 杨海军 |
地址: | 210029 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 肿瘤 活性 蜀葵 多糖 及其 制备 方法 | ||
1.一种具有抗肿瘤活性的黄蜀葵花多糖,其特征在于,该多糖由摩尔比为1:0.91:2.14:1.0的β-D-吡喃葡萄糖、α-D-吡喃甘露糖、α-D-半乳糖和α-L-吡喃岩藻糖构成,该多糖的基本单元的结构式为:
该多糖的分子量为8867。
2.权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的黄蜀葵花多糖的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)脱脂处理
称取黄蜀葵花药材,用总药材总量8~16倍的无水乙醇,在50~70℃水浴温浸泡6~12小时,趁热抽滤,得药渣挥尽乙醇后60~70℃干燥,得脱脂黄蜀葵花药材;
(2)粗多糖的提取
取步骤(1)脱脂后的黄蜀葵花药材,加入药材总重量8~12倍量的水,在60~70℃温度下浸渍提取1~3次,每次6~8h,滤过,合并滤液,在2000~3000rpm离心10~20min,得上清液在65~70℃下减压浓缩至原体积的1/10,然后加浓度为95%乙醇使乙醇的浓度达70%,然后在4℃静置24h后滤取沉淀,沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤,减压干燥,得黄蜀葵花粗多糖;
(3)粗多糖脱蛋白质
取步骤(2)制备得到的黄蜀葵花粗多糖,完全溶解于蒸馏水中,然后加入浓度30%的三氯乙酸溶液至三氯乙酸终浓度为3%,在4℃静置5~8h,然后3000~3500rpm 离心 10~15min,除去沉淀,得上清液用NaOH溶液调pH至中性,减压浓缩,浓缩液透析,截取分子量8000Da以上成分,得除蛋白的粗制多糖溶液;
(4)DEAE-52纤维柱层析
取步骤(3)脱蛋白后的粗多糖溶液,上样于DEAE-52纤维层析柱中,然后分别用:蒸馏水、0.05 mol/L NaCl、0.1 mol/L NaCl、0.25 mol/L NaCl、0.5 mol/L NaCl进行分段洗脱,控制流速0.5mL/min,分别收集洗脱液,采用硫酸-苯酚法跟踪检测多糖部位,合并多糖洗脱部位;
(5)SephadexG-100 凝胶柱层析
取步骤(4)经DEAE-52纤维柱纯化后的黄蜀葵花多糖上SephadexG-100 凝胶柱,用蒸馏水洗脱,控制流速0.3mL/min,收集洗脱液,采用硫酸-苯酚跟踪检测,得精制的黄蜀葵花多糖。
3.权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的黄蜀葵花多糖在制备防治肿瘤药物中的应用。
4.根据权利要求3所述的具有抗肿瘤活性的黄蜀葵花多糖在制备防治肿瘤药物中的应用,其特征在于,所述的肿瘤为人胃癌或人肝癌。
5.根据权利要求3所述的具有抗肿瘤活性的黄蜀葵花多糖在制备防治肿瘤药物中的应用,其特征在于,把黄蜀葵花多糖和药学上可接受的载体制成片剂、胶囊剂、颗粒剂或微囊剂剂型的药物。
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