[发明专利]一种快速区别两种相似药材的判断方法有效
申请号: | 201210551072.6 | 申请日: | 2012-12-18 |
公开(公告)号: | CN103033584A | 公开(公告)日: | 2013-04-10 |
发明(设计)人: | 纪兰菊;孙洪发;张小龙;张海涛;冯丽娟 | 申请(专利权)人: | 中国科学院西北高原生物研究所 |
主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88 |
代理公司: | 兰州中科华西专利代理有限公司 62002 | 代理人: | 李艳华 |
地址: | 810001 *** | 国省代码: | 青海;63 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 区别 相似 药材 判断 方法 | ||
1.一种快速区别两种相似药材的判断方法,包括以下步骤:
⑴精密吸取0.232mg/ml的獐牙菜苦苷标准品溶液4.0μl、8.0μl、12.0μl、16.0μl、20.0μl,然后分别进样,采用高效液相色谱仪以甲醇-0.02%磷酸溶液为流动相,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱,在检测波长240~260nm,理论塔板数按獐牙菜苦苷峰计算不低于3000的条件下进行分析,并测定积分峰面积,最后以峰面积积分值为纵坐标,獐牙菜苦苷含量为横坐标,绘制标准曲线,并计算得到獐牙菜苦苷的回归方程Y=96470.4x+226293.15,r=0.9998;
⑵精密吸取0.61mg/ml的龙胆苦苷标准品溶液4.0μl、8.0μl、12.0μl、16.0μl、20.0μl,然后分别进样,采用高效液相色谱仪以甲醇-0.02%磷酸溶液为流动相,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱,在检测波长240~260nm,理论塔板数按龙胆苦苷峰计算不低于3000的条件下进行分析,并测定积分峰面积,最后以峰面积积分值为纵坐标,龙胆苦苷含量为横坐标,绘制标准曲线,并分别计算得到龙胆苦苷的回归方程Y=-294961.8x+2003098.5,r=0.9992;
⑶按常规方法分别对獐牙菜苦苷、龙胆苦苷的回归方程依次进行精密度试验、稳定性试验、重现性试验、回收率试验以验证该回归方程的可行性;
⑷采集獐牙菜样品:将采集或收购的已阴干干燥、拣选除杂后的獐牙菜经粉碎过四号筛后,取2~3 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50 ml,密塞,称定重量,在55~75℃温度下加热回流30min,室温下冷却,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,过0.45μm滤膜除去杂质,精密量取10μl进样即得;
⑸对所述獐牙菜样品采用高效液相色谱仪以甲醇-0.02%磷酸溶液为流动相,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱,在检测波长240~260nm,理论塔板数按獐牙菜苦苷峰、龙胆苦苷峰计算不低于3000的条件下进行测试,并利用所述獐牙菜苦苷的回归方程、龙胆苦苷的回归方程分别得到所述獐牙菜样品中的獐牙菜苦苷含量和龙胆苦苷含量;
⑹当獐牙菜苦苷含量均低于1%且龙胆苦苷含量均高于1%时,则该獐牙菜样品为川西獐牙菜;当獐牙菜苦苷含量均高于2%且龙胆苦苷含量均低于1%时,则该獐牙菜样品为抱茎獐牙菜。
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