[发明专利]细胞培养装置、以及无血清细胞培养方法

说明书

技术领域

本发明系有关于一种细胞培养装置以及细胞培养方法，且特别是有关于一种无血清细胞培养装置及细胞培养方法。

背景技术

动物或人类细胞的体外培养，在传统研究上系使用含有动物血清的体外培养基。然而血清之使用除了会使产物回收纯化之困难度提升外，甚且易伴随感染性物质污染、以及批次间品质不易控制的严重问题。

对于以无血清培养基(serum free medium,SFM)培养贴附细胞时，通常会将细胞外基质(extracellular matrix,ECM)涂布于培养器皿上或加于培养基中，协助细胞贴附生长，未贴附的细胞则会走向凋亡(apoptosis)。细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的主要成分为糖胺聚糖(glycosaminoglycan、GAG)、或更包含纤维状蛋白质(fibrous protein，例如：胶原(collagen)、层粘连蛋白(laminin)、纤连蛋白(fibronectin)、弹性蛋白(elastin))。举例来说，Invitrogen公司所制造贩售的StemPro MSC SFM即需要搭配含细胞外基质(例如CELLstart^TM、由Invitrogen制造及贩售)涂布于培养皿上。然而，由于细胞外基质绝大部分为生物性蛋白质，因此生产成本高，且大多系由人类组织或血液中提取纯化而得，因此品质较不稳定。

基于上述，发展出可替代细胞外基质以促进贴附细胞生长的培养装置，避免细胞外基质的使用，实为目前细胞培养技术所期盼。

发明内容

本发明提出一种细胞培养装置，包含：基质，其中该基质具有表面；以及，聚合物位于该表面上。值得注意的是，该聚合物系由第一单体及第二单体经由聚合反应所形成，其中该第一单体具有公式(I)所示结构，且该第二单体具有公式(II)所示结构：

公式(I)公式(II)

其中，R¹系为氢、或甲基；R²系为甲基、乙基、或-CH₂CH₂OCH₃；R³系为氢、或甲基；及R⁴系为氢、-CH₂CH₂OCOCHCHCOOH、-CH₂CH₂OCOCH₂CH₂COOH、或-CH₂CH₂COOH。在一个实施方案中，所述聚合物是无轨共聚物。

本发明亦提供一种无血清细胞培养方法，包含：提供具有聚合物之基质；以及，将细胞置于该聚合物表面，以进行细胞培养。其中，该聚合物系由第一单体及第二单体经由聚合反应所形成，其中该第一单体具有公式(I)所示结构，且该第二单体具有公式(II)所示结构：

公式(I)公式(II)

其中，R¹系为氢、或甲基；R²系为甲基、乙基、或-CH₂CH₂OCH₃；R³系为氢、或甲基；及R⁴系为氢、-CH₂CH₂OCOCHCHCOOH、-CH₂CH₂OCOCH₂CH₂COOH、或-CH₂CH₂COOH。值得注意的是，在本发明所述之无血清细胞培养方法中，并没有使用血清(serum)或细胞贴附因子(cellattachment factor)。在一个实施方案中，所述聚合物是无轨共聚物。

为让本发明之上述和其它目的、特征、和优点能更明显易懂，下文特举出较佳实施例，并配合所附图式，作详细说明如下：

附图说明

图1系为剖面示意图，用以说明本发明一实施例所述之细胞培养装置。

图2a-2c系分别为实施例51、58、及其对照组所述之细胞培养装置培养3天后，在显微镜观察下所拍摄的照片。

图3a-3g系分别为实施例14、16、18、20、22、24、及其对照组所述之细胞培养装置培养3天后，在显微镜观察下所拍摄的照片。