[发明专利]山楂核中总木脂素的制备方法及新用途

说明书

技术领域

本发明涉及植物医药技术领域，尤其涉及植物山楂核中总木脂素的制备方法及在制备抗肿瘤药物中的新应用。

背景技术

恶性肿瘤是危害人类健康和生命的主要疾病。据估计全世界每年约有500万人死于恶性肿瘤，是继心血管疾病之后的第二大致死病因。因此，全球每年投入大量的人力物力用于研究和开发防治癌症的新药物。近年来，药物学专家除了研究西药外，也对中药进行了深入的研究，迄今为止至少评估了4万余种高等植物的抗肿瘤活性。据国外资料介绍，全世界已经开发了几百种抗癌新药，其中很多属于天然植物提取物。

山楂 (Crataegus)为蔷薇科 (Rosaceae)山楂属植物，落叶稀半常绿灌木或小乔木，全世界大约有280种，也有文献报道在1000种以上。主要分布于北温带大约在北纬30度到50度之间的东亚、欧洲和北美洲等地，据中国植物志记载山楂在我国约有 17种，2变种，其中山里红 Crataegus pinnatifida Bge var. Major N. E. Br.山楂 Crataegus pinnatif  Bge.及野山楂 Crataegus cuneata Sieb.& Zucc.最为常见。山楂性温 ，味酸、甘微温，归脾、胃、肝经，具有消食化积、活血化瘀的功效，临床主要用于食滞不化及产后瘀阻腹痛，以及高血压、冠心病、高血脂的治疗。郭法长[郭法长，焦风云，张茂林等.山楂抗癌有效成分的研究[J].河南医科大学学报.1992，27（4）：312-314.]等研究证实山楂中提取的多酚类化合物是较强的抗癌有效成分，可以消除亚硝酸盐，其消除率为86.4%，能抑制人淋巴细胞程序外DNA损伤，其抑制率为71.5%，可以使接种艾氏腹水癌的昆明小鼠的生命延长18d，其生命延长率为180%。但在本发明前，还未有见到山楂核有效部位抗肿瘤活性的报道。

山楂核的化学成分与山楂果实、叶有较大区别，主要成分有简单苯丙素类、木脂素类、倍半木脂素等。其中含量较大的化合物如下所示：

有文献报道该类型化合物具有较强的抑制肿瘤细胞活性，同时由于山楂属于药食同源类植物，无毒、副作用。从其中开发出来的抗肿瘤药物具有低毒高效的特点，有十分宽广的市场前景。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种植物山楂核的总木脂素的制备方法，该方法是将取山楂核原料粉碎成粗粉，用甲醇或乙醇提取，减压浓缩得到粗提物后用水混悬，再上大孔树脂以水醇系统洗脱得到总木脂素。该方法采用大孔树脂层析一步即可获得有效部位，该方法具有操作简单、成本较低、获得的总木脂素纯度高的优点。具体通过以下步骤实现：

1. 取山楂核原料粉碎成粗粉，用5~10倍体积量的甲醇或乙醇提取2~4次，甲醇或乙醇的体积浓度为50%~100%，提取采用加热回流或超声提取；

2. 将提取液合并后减压浓缩，除去甲醇或乙醇，减压浓缩干燥既得浸膏，得率约为2%~5%；

3. 浸膏加水混悬后，上大孔树脂，10%~20%乙醇-水系统洗脱2~6个柱体积后再用体积浓度30%~50%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，喷雾干燥得到干燥粉末，总得率约为2%~5%。采用的大孔树脂为DM301、NKA-9、AB-8、D101、DM130、DM-18、D312型弱极性或中极性大孔树脂。所得的总木脂素利用FeCl₃颜色反应呈阳性，且HCl-Mg反应呈阴性，排除了黄酮类化合物的影响，利用HPLC分析，色谱图中的最大色谱峰为(+)-balanophonin，确定所得提取物为总木脂素。利用可见分光光度法，以(+)-balanophonin （自制，纯度97%）为对照品，0.6%FeCl₃-0.9%K₃[Fe(CN)₆] (1:0.9)混合溶液为显色剂，检测波长720nm，检测结果显示所得提取物总木脂素含量在60%~90%。

本发明的目的之二是提供山楂核中总木脂素在制备抗肿瘤药物中的新用途。所述的植物山楂核中总木脂素加入药剂学允许的赋型制剂制备成药物制剂，制剂形式为口服制剂，所述口服制剂包括片剂、胶囊剂、丸剂或颗粒剂。