[发明专利]一种促进高山杜鹃紫水晶组培生根的技术方法

说明书

一、技术领域

本发明属于植物栽培技术领域，尤其是木本观赏植物组培快繁方法领域，具体涉及一种促进高山杜鹃紫水晶组培生根的技术方法。 

二、背景技术

高山杜鹃是杜鹃花科杜鹃花属中常绿阔叶种类及其杂交后代的总称，常生长于海拔1000m以上的高山上。紫水晶(Rhododendron hybrids‘Roseum Elegans’)是目前市场上比较受欢迎的高山杜鹃之一，常绿灌木或小乔木，高可达3米，花期4-5月份，花为略显玫红色的丁香紫色，漏斗状，单朵花直径达6cm，花瓣带有棕色花纹图案，总状伞型花序直径可达15-30cm，叶大色深，特耐寒且耐热，-26℃下不落叶，抗病力强。紫水晶因其花序硕大、花色鲜艳、叶片四季常青而备受人们的喜爱，不仅是国内高档的年宵花卉，也是国际上高档的园林绿化美化材料，必将成为我国高档园林绿化树种应用的新秀，具有广阔的市场开发前景。 

目前，国内市场上销售的高山杜鹃基本全是从国外进口，每盆售价高达数百至上千元，价格一直居高不下，种苗市场紧俏。且在栽培过程中发现高山杜鹃扦插成活率低、种子繁殖性状分离等问题，因此国内已经有科研工作者从事高山杜鹃组织培养技术的研究，已成功建立组织培养快繁体系的种类有马缨杜鹃、云锦杜鹃以及一些国外品种(Lee’s Dark Purple、Rocket、Jean de Marle Montage、Nova Zembla、Cosmopolitan等)，但在紫水晶组织培养特别是生根技术方面的研究仍未见报道。 

三、发明内容

本发明的目的在于提供一种促进高山杜鹃紫水晶组培生根的技术方法。 

为实现本发明的目的，本发明提供了如下技术方案： 

1、一种促进高山杜鹃组培苗生根的方法，其内容包括：在无菌超净工作台上，将生长健壮的无菌丛生芽用剪刀剪下，接种到如下生根培养基中：1/2WPM基本培养基，添加NAA10mg/L，蔗糖10g/L，活性炭0.3g/L，琼脂粉6g/L。先进行3天的暗培养，然后光培养7天结束后，在无菌超净工作台上，将芽苗取出，转接到不含激素的1/2WPM基本培养基中，继续进行30-40天的光培养。 

2、在本发明中：WPM培养基是参考Lloyd G and McCown B(1980)的文献，1/2WPM即大量元素和微量元素用量为原文献里元素用量的一半，而其他元素(包括有机元素和铁盐)均不变。参考文献：LloydG and McCown B.Commercially-feasible micropropagation of mountain laurel，Kalmia latifolia，by use of shoottip culture[J].Combined Proceedings-International Plant Propagators’Society，1980，30：421-427 

3、在本发明中：NAA即为萘乙酸(1-naphthylacetic acid)。 

4、在本发明中：采用的是100ml的锥形玻璃瓶作为培养器皿，每瓶中分装的培养基为40-50ml，培养基添加激素并调至pH值53-5.8后，分装，在121℃下高压灭菌20min。 

5、在本发明中：光培养条件为白天温度为25±1℃，夜间温度为20±1℃，光照强度为50μmol·m^-2·s^-1，每天光照12h。暗培养条件为白天温度为25±1℃，夜间温度为20±1℃，无光照。 

本发明经过以下试验，优选总结出上述最佳的技术参数： 

(1)、应用正交设计，从不同激素种类、激素浓度、转空白培养前天数、糖用量4个方面探讨紫水晶组培苗生根的情况，应用L₉(3)⁴正交表，共设9个处理，以不添加激素和30g/L糖为对照，实验设计及结果如下表1： 

表1高山杜鹃紫水晶组培生根正交试验结果分析表 

根据正交分析，当激素种类选择NAA、浓度为10mg/L、转空白培养前天数为10d以及糖用量为10g/L时，生根效果将会最佳。 

(2)、在试验(1)的基础上，将最优试验处理组合(培养基中NAA 10mg/L，转空白培养前天数为10d以及糖用量为10g/L)与正交试验4进行比较试验。结果表明最优试验处理组合和正交试验4的生根率分别为56.8％、42.1％，二者存在着显著差异，且最优试验处理组合的组培苗根系较粗壮、根系二级分支较多。