[发明专利]石刁柏植株的天冬酰氨酶含量差异的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种石刁柏植株的天冬酰氨酶含量差异的检测方法。 

背景技术

石刁柏，风味独特、营养丰富，更有防癌、抗癌的神奇功效，素有“蔬菜王”之美称。这主要是因为其含有多种调节人体生理功能、预防慢性病发生等保健作用的生物活性物质。石刁柏中所含的天冬酰胺酶，对乳腺癌、肺癌、食管癌、膀胱癌、皮肤癌、胃癌、直肠癌等均有一定的疗效。但目前市场上的天冬酰胺酶均为由大肠杆菌（E.coli）和欧文菌（Erwinia）等制备的L-天冬酰胺酶，但对如何确定植物中天冬酰胺酶含量的差异，目前未见有相关检测方法的报道。 

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种石刁柏植株的天冬酰氨酶含量差异的检测方法，可以检测出石刁柏植株不同部位的天冬酰胺酶含量的差异，从而解决目前没有方法可以检测出石刁柏的天冬酰氨酶含量差异的问题。 

通过以下技术方案解决上述技术问题： 

本发明实施例提供一种石刁柏中天冬酰氨酶含量差异的检测方法，包括： 

抽取石刁柏植株，取所述植株的根、茎和叶片作为样品，分别制成样品溶液，将所述样品溶液分别与对照品溶液通过比色法进行比色分析，通过计算光吸收值比较得到石刁柏各部位的天冬酰氨酶含量的差异。 

本发明实施例提供的方法，通过将石刁柏植株的根、茎和叶片制成样品溶液，利用比色法进行比色分析，可以准确比较出石刁柏植株各部位的天冬酰氨酶含量的差异，从而为利用石刁柏植株提取天冬酰氨酶提供了准确的依据，可以大大提高从石刁柏中提取天冬酰氨酶的效率，缓解天冬酰氨酶市场供不应求的问题。 

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域的普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他附图。 

图1为本发明实施例提供的方法检测石刁柏根中天冬酰氨酶活性（U/ml）示意图； 

图2为本发明实施例提供的方法检测石刁柏茎中天冬酰氨酶活性（U/ml）示意图； 

图3为本发明实施例提供的方法检测石刁柏叶中天冬酰氨酶活性（U/ml）示意图。 

具体实施方式

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明的保护范围。 

本发明实施例提供一种石刁柏植株的天冬酰氨酶含量差异的检测方法，包括以下步骤： 

抽取石刁柏植株，取所述植株的根、茎（茎可以是取从茎顶端至底端长20cm，基部平均直径0.5～1.2cm的材料，可以是业内常指的嫩茎）和叶片作为样品，分别制成样品溶液，将所述样品溶液分别与对照品溶液通过比色法进行比色分析，通过计算光吸收值比较得到石刁柏各部位的天冬酰氨酶含量的差异。 

进一步的，上述方法中，抽取石刁柏植株之前，还包括：对石刁柏植株进行雌雄鉴定的步骤，这样可以检测出雌雄株的石刁柏植株的各部位的天冬酰氨酶含量的差异。 

进一步的，上述方法中，抽取石刁柏植株之前，还包括对石刁柏植株品种进行鉴定的步骤，这样可以检测出不同品种的石刁柏植株的各部位的天冬酰氨酶含量的差异。也可以对石刁柏植株同时进行品种以及雌雄株的鉴定。 

上述方法中，通过以下方式制成样品溶液： 

将样品（从石刁柏植株取得的根、茎及叶片）用水洗净，在105℃的温度下烘烤15分钟杀酶，在70℃的温度下烘干、粉碎、以20目筛过筛得到样品干粉； 

称取1.5g所述样品干粉，滤纸包裹后放置于索氏提取器中，用无水乙醚加热回流提取1小时，倾去乙醚溶液；待滤纸包挥干乙醚后，置于索氏提取器中，加甲醇加热回流提取6小时，回收甲醇后，转移至100ml量瓶，并用甲醇定容到刻度，摇匀； 

吸取样品溶液1ml，置10ml量瓶中，加质量浓度5%的AlCl₃甲醇溶液1ml，用甲醇稀释至刻度，摇匀，静置10分钟，即得到样品溶液。 

上述方法中的对照品溶液通过以下方式制得，包括： 

将所述样品用水洗净，在105℃的温度下烘烤15分钟杀酶，在70℃的温度下烘干、粉 碎、以20目筛过筛得到样品干粉；