[发明专利]一种从发酵液中提取鸟苷的方法

说明书

技术领域

本发明属于发酵技术领域，具体涉及一种从发酵液中提取鸟苷的方法。

背景技术

鸟苷(Guanosine)又名9-β-D-呋喃核糖基鸟嘌呤，简称鸟苷(GR)，英文名Guanosine。鸟苷是嘌呤核苷类物质的一种，由鸟嘌呤与核糖(呋喃核糖)组成，两者之间由β-N9-配糖键相连。鸟苷为白色结晶性粉末，二水化合物为针状结晶，110℃失水，分子式C₁₀H₁₃N₅O₅，相对分子质量283.24，熔点240℃(分解)，比旋光度-60°，能溶于稀矿酸、热乙酸、稀碱(1g/33mL)，沸水，微溶于冷水(1g/1320mL)，不溶于醇、醚、氯仿和苯，其结构式如下：

鸟苷的用途十分广泛，是食品和医药产品的重要中间体，在医药工业中，鸟苷是抗病毒药物三氮唑核苷、无环鸟苷的合成原料。在食品工业中，鸟苷可用于合成食品增鲜剂5’-鸟苷酸二钠、呈味核苷酸二钠。目前国内鸟苷市场需求急剧上升，因此开发鸟苷具有重要意义。

发酵法是目前最常用的鸟苷生产方法，具有生产率高、周期短、易控制、产量大等优点，适宜于大规模工业化生产。其中，从发酵液中分离提取鸟苷是发酵法生产鸟苷的重要步骤，直接影响鸟苷产品生产效率。目前大多数从发酵液中提纯分离鸟苷的方法主要是发酵液过膜除去菌体，得到的滤清液再通过絮凝、脱色或工业色谱法进步精制获得鸟苷。然而现有的提纯分离鸟苷的方法排放的一次母液中鸟苷含量较高，导致鸟苷收率很低。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种收率高的从发酵液中提取鸟苷的方法。

为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

一种从发酵液中提取鸟苷的方法，包括以下步骤：

步骤1、取鸟苷发酵液过滤，得到的滤液采用阴离子交换树脂柱进行离子交换，然后用氢氧化钠与氯化钠的混合液解析得到离交液；

步骤2、取步骤1所得的离交液，调pH至7.0-7.5，冷却育晶，分离得到鸟苷粗品，鸟苷粗品重结晶、分离干燥即得。

作为优选，本发明步骤1所述过滤的过滤介质为陶瓷膜。

作为优选，步骤1所述离子交换中所述阴离子交换树脂的用量为所述滤液体积的40~55v/v%。更优选为所述滤液体积的44.4~50v/v%。

作为优选，步骤1所述所述阴离子交换树脂为强碱型阴离子交换树脂。更优选为711型交换树脂。

作为优选，步骤1所述滤液上阴离子交换树脂柱的流速为1BV~2BV。

作为优选，步骤1所述氢氧化钠与氯化钠的混合液中氢氧化钠的浓度为2.5wt%~3wt%，氯化钠的浓度为0.5wt%~0.8wt%。

作为优选，步骤2所述离交液调pH值具体为用盐酸调pH值。

作为优选，步骤2所述冷却结晶为缓慢降温至5～15℃，维持4小时。

作为优选，步骤2所述重结晶具体为鸟苷粗品加水于90℃溶解，冷却育晶。

作为优选，所述加水溶解中所述水的加入量为鸟苷粗品质量的20倍~22倍。

从上述的技术方案可以看出，本发明所述从发酵液中提取鸟苷的方法为取鸟苷发酵液过滤，得到的滤液采用阴离子交换树脂柱进行离子交换，然后用氢氧化钠与氯化钠的混合液解析得到离交液，调pH至7.0-7.5，冷却育晶，分离得到鸟苷粗品，重结晶、分离干燥即得鸟苷。本发明所述提取方法鸟苷发酵液经过滤除去菌体后直接上阴离子交换树脂柱进行离子交换吸附，阴离子交换树脂柱可选择性的吸附滤液中的大部分鸟苷，而将滤液中大量的色素、杂蛋白等去除，避免滤液中的鸟苷随一次母液排放造成鸟苷的损失，提高了鸟苷收率。离子交换后再用氢氧化钠与氯化钠的混合液将吸附的鸟苷解析下来得到离交液，由于滤液中大量的色素、杂蛋白已被去除，因此离交液颜色清澈，蛋白、色素及残糖等杂质少，可直接经结晶得到鸟苷，避免了絮凝除蛋白和脱色的步骤，进而缩短了提取流程，减少了鸟苷的损失。本发明进一步通过调节pH至7.0-7.5使离交液中鸟苷溶解度降低，结晶析出，分离得到鸟苷粗品，重结晶得到鸟苷纯品，使纯品中鸟苷含量≥98％，提高了提取的鸟苷的纯度。并且本发明所述提取方法操作简单，安全性高，工艺成本低，适合工业化生产。

附图说明

图1示本发明所述提取鸟苷的方法的流程图；

图2示现有技术中提取鸟苷的方法的流程图。

具体实施方式