[发明专利]胃黏膜样品中幽门螺旋杆菌的化学发光免疫测定法

权利要求书

1.一种胃黏膜样品中幽门螺旋杆菌的化学发光免疫测定法包括以下步骤：

（a）制作带检测物质的样品稀释液

将含有幽门螺旋杆菌的一种胃黏膜样品悬浮于样品稀释液；

（b） 抗体-抗原复合体的形成

把样品稀释液中的胃黏膜样品与抗幽门螺旋杆菌抗原的第一种多克隆抗体接触以形成抗体-抗原复合体；

（c）把步骤（b）的样品和步骤（b）所得到的抗体-抗原复合体进行分离；

（d）抗体-抗原-抗体复合体的形成

把步骤（c）得到的分离后的抗体-抗原复合体暴露于抗幽门螺旋杆菌抗原的第二种多克隆抗体，并把抗幽门螺旋杆菌抗原的第二种多克隆抗体的一部分与复合体反应， 其中所述的第一种多克隆抗体和第二种多克隆抗体中的其中一种多克隆抗体结合在一种固体载体上，而另一种多克隆抗体用一种检测剂进行标记；

（e）发光底物的添加

在含有抗体-抗原-抗体复合体的固体载体中添加发光底物；

（f）测定发光底物产生的光信号的量

其特征是：所述样品稀释液含有蛋白质和碱性物质，样品稀释液的pH在8.0~10之间。

2.根据权利要求1所述的一种胃黏膜样品中幽门螺旋杆菌的化学发光免疫测定法，其特征是：所述步骤（a）中样品稀释液中的蛋白质为选自胎（小）牛血清、正常山羊血清、豚鼠血清、马血清、酪蛋白、白蛋白、明胶和牛血清白蛋白中的一种。

3.根据权利要求1所述的一种胃黏膜样品中幽门螺旋杆菌的化学发光免疫测定法，其特征是：所述步骤（a）样品稀释液中的碱性物质包含但不限于三羟甲基甲胺基丙磺酸、N，N-双(2-羟乙基)甘氨酸、三羟甲基氨基甲烷、N-三-(羟甲基)甲基氨基乙酸、 4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸半钠盐、N-三(羟甲基)甲基-2-氨基乙磺酸、3-（N-吗非啉）乙磺酸、四硼酸钠缓冲液、碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液、甘氨酸缓冲液中的一种或多种组合，其中碱性物质为pH大于8的缓冲液。

4.根据权利要求1或2或3所述的一种胃黏膜样品中幽门螺旋杆菌的化学发光免疫测定法，其特征是：所述步骤（a）样品稀释液中还设有胃蛋白酶抑制剂。

5.根据权利要求4所述的一种胃黏膜样品中幽门螺旋杆菌的化学发光免疫测定法，其特征是：所述胃蛋白酶抑制剂包含但不限于抑肽素、硫柳汞中的一种。

6.根据权利要求1或2或3所述的一种胃黏膜样品中幽门螺旋杆菌的化学发光免疫测定法，其特征是：其中步骤（d）中固体载体为酶标反应板或纤维素膜。

7.根据权利要求1或2或3所述的一种胃黏膜样品中幽门螺旋杆菌的化学发光免疫测定法，其特征是：其中步骤（d）中检测剂选自辣根过氧化物酶。

8.根据权利要求4所述的一种胃黏膜样品中幽门螺旋杆菌的化学发光免疫测定法，其特征是：其中步骤（d）中检测剂选自辣根过氧化物酶。

9.根据权利要求1或2或3所述的一种胃黏膜样品中幽门螺旋杆菌的化学发光免疫测定法，其特征是：所述步骤（e）中发光底物为鲁米诺（Luminol）底物，鲁米诺（Luminol）底物含有鲁米诺、过氧化氢和复合型增强剂。

10.根据权利要求9所述的一种胃黏膜样品中幽门螺旋杆菌的化学发光免疫测定法，其特征是：所述复合型增强剂为对碘苯酚。