[发明专利]一种猪笼草组织培养育苗的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，尤其是涉及一种猪笼草组织培养育苗的方法。

背景技术

猪笼草是猪笼草科，猪笼草属于亚木质藤本植物，又名担水桶、猴水瓶、猪仔笼等，是著名的食虫植物，其美丽的瓶状叶特别诱人，是目前食虫植物中最受人们青睐的种类之一。猪笼草原产东南亚和澳大利亚的热带地区，虽然在广东省南部和海南省等亚热带地区也有野生品种分布，但很少应用。20世纪80年代以后，在花卉市场偶见从国外引进的猪笼草优良品种，主要用于花卉展览，其价格较高，但远远满足不了市场需求，为满足市场需求，让猪笼草进入千家万户，成为常见的盆栽花卉，有必要研究一种适于大量繁殖的培养育苗方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种出苗快、稳定性高、苗壮、种苗品质好、抗性强、生长良好的猪笼草组织培养育苗的方法。

本发明的技术方案是一种猪笼草组织培养育苗的方法，包括如下步骤：

(1)、在春季，选取生长旺盛的猪笼草，剪取带芽的茎段，长4～5cm，将叶柄剪去，用自来水冲洗，然后用洗衣粉浸泡数分钟，再用软毛刷进行刷洗，在刷洗中，避免弄伤腋芽，然后再用自来水进行冲洗1小时；

(2)、将经过步骤(1)处理的材料用75％的酒精进行表面消毒，然后置于0.1％的升汞溶液中5～8分钟，添加吐温2～3滴；然后用无菌水冲洗5～6次；

(3)、用无菌纸将已步骤(2)中已灭菌的材料的水分吸干然后进行切割，切成1.5～2.0cm带腋芽的茎段，接种于MS培养基上，且培养基中加入3％蔗糖、0.7％卡拉胶粉，pH为5.8，；

(4)、带长出小芽长到2～3cm，将小芽切下，接种在增值培养基上；

(5)、待丛芽苗长高到3～4cm，将它从基部切下，接种到生根培养基中，除了基部以外的其余部分转入MS培养基中继续培养；

(6)、将生根培养基放到温棚中，当不定根长到1.6cm～2cm时，在自热光照下炼苗10天，然后打开瓶塞，在炼苗2天，将试管苗从培养瓶中取出，洗净，种植到培养基质上。

优选的，步骤(3)中MS培养基置于温度为26～27°C，光照强度为1600～1900lx，光照时间每天为12h。

优选的，步骤(6)中培养基质由沙、珍珠岩、红壤配制而成，且沙、珍珠岩与红壤的质量比为3：1：1。

优选的，步骤(5)中的生根培养基为1/2MS培养基，加入6-苄基嘌呤，浓度为0.1g/L，萘乙酸，浓度为0.5mg/L，以及活性炭培养基，浓度为0.05％。

本发明的优点及效果：本发明提供的组织培养育苗方法和使用的培养基，其外植体消毒方法、培养基成分独特，而且方法简单实惠，应用价值高，具有出苗快、稳定性高、苗壮、种苗品质好、抗性强、生长良好等优势，加快了猪笼草的繁殖速度，为满足市场的需求提供了一条有效的途径。

具体实施方式

为了理解本发明，下面通过具体的实施例对本发明作进一步说明。

一种猪笼草组织培养育苗的方法，包括如下步骤：

(1)、在春季，选取生长旺盛的猪笼草，剪取带芽的茎段，长4～5cm，将叶柄剪去，用自来水冲洗，然后用洗衣粉浸泡数分钟，再用软毛刷进行刷洗，在刷洗中，避免弄伤腋芽，然后再用自来水进行冲洗1小时；

(2)、将经过步骤(1)处理的材料用75％的酒精进行表面消毒，然后置于0.1％的升汞溶液中5～8分钟，添加吐温2～3滴；然后用无菌水冲洗5～6次；

(3)、用无菌纸将已步骤(2)中已灭菌的材料的水分吸干然后进行切割，切成1.5～2.0cm带腋芽的茎段，接种于MS培养基上，且培养基中加入3％蔗糖、0.7％卡拉胶粉，pH为5.8，；

(4)、带长出小芽长到2～3cm，将小芽切下，接种在增值培养基上；

(5)、待丛芽苗长高到3～4cm，将它从基部切下，接种到生根培养基中，除了基部以外的其余部分转入MS培养基中继续培养；

(6)、将生根培养基放到温棚中，当不定根长到1.6cm～2cm时，在自热光照下炼苗10天，然后打开瓶塞，在炼苗2天，将试管苗从培养瓶中取出，洗净，种植到培养基质上。

步骤(3)中MS培养基置于温度为26～27°C，光照强度为1600～1900lx，光照时间每天为12h。

步骤(6)中培养基质由沙、珍珠岩、红壤配制而成，且沙、珍珠岩与红壤的质量比为3：1：1。