[发明专利]一种多重点样、双层电泳检测微卫星DNA的琼脂糖凝胶电泳方法有效
申请号: | 201210490639.3 | 申请日: | 2012-11-27 |
公开(公告)号: | CN102967644A | 公开(公告)日: | 2013-03-13 |
发明(设计)人: | 高美玲;袁成志;王世发;王芳;赵芳芳 | 申请(专利权)人: | 齐齐哈尔大学 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447 |
代理公司: | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 | 代理人: | 韩末洙 |
地址: | 161006 黑龙江*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 多重 双层 电泳 检测 卫星 dna 琼脂 凝胶电泳 方法 | ||
1.一种多重点样、双层电泳检测微卫星DNA的琼脂糖凝胶电泳方法,其特征在于多重点样、双层电泳检测微卫星DNA的琼脂糖凝胶电泳方法是按照以下步骤进行的:
一、利用微卫星分子标记对不同群体或群体中不同个体的基因组DNA进行PCR扩增,得待检测扩增产物;
二、制备同样面积的两块3%的琼脂糖凝胶,取其中一块3%的琼脂糖凝胶作为下层琼脂糖凝胶,另一块3%的琼脂糖凝胶平行放置在下层琼脂糖凝胶上,作为上层琼脂糖凝胶,将下层琼脂糖凝胶与上层琼脂糖凝胶放入电泳缓冲液中,备用;
三、取步骤一中待检测扩增产物在下层琼脂糖凝胶上样后,进行电泳,待扩增产物与点样孔距离为1~2cm时,切断电源,停止电泳;
四、在下层琼脂糖凝胶的凝胶孔继续上样,接通电源,继续进行电泳,待扩增产物与点样孔距离为1~2cm时,切断电源,停止电泳;然后在上层琼脂糖凝胶上样,接通电源,继续进行电泳,待扩增产物与点样孔距离为1~2cm时,切断电源,停止电泳;
五、重复步骤四的操作,直至待检测的扩增产物跑到凝胶底部时,切断电源,停止电泳;
六、采用紫外凝胶成像系统对电泳结果进行检测,即完成多重点样、双层电泳检测微卫星DNA的琼脂糖凝胶电泳。
2.根据权利要求1所述的一种多重点样、双层电泳检测微卫星DNA的琼脂糖凝胶电泳方法,其特征在于步骤一至步骤五中电泳的电压为7~8V/cm。
3.根据权利要求1所述的一种多重点样、双层电泳检测微卫星DNA的琼脂糖凝胶电泳方法,其特征在于步骤二中所述的电泳缓冲液温度为0~4℃。
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