[发明专利]一种应用于混合建库的高通量测序接头及其建库方法无效
| 申请号： | 201210487657.6 | 申请日： | 2012-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN102978206A | 公开（公告）日： | 2013-03-20 |
| 发明（设计）人： | 蒋智;刘少卿;吴静;彭献军 | 申请（专利权）人： | 北京诺禾致源生物信息科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/68;C40B50/06 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100083 北京市昌平区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 应用于 混合 通量 接头 及其 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种接头序列A，其特征在于：
由序列表中序列1或2或3和4所示的核苷酸序列组成的接头。
2.一种运用如权利要求1所述的接头A，混合构建不同样品文库的方法，其特征在于，包括如下步骤：
1）将基因组DNA打碎，大小集中在300 bp左右；
2）对步骤1）得到的打碎产物纯化回收之后，进行末端补平；对末端补平的产物进行3’加dATP；将加dATP的产物连上接头A；
3）对步骤2）得到的连接产物进行混合后，跑琼脂糖凝胶电泳分析；根据所需文库大小选择片段；
4）将片段纯化并定量后进行PCR扩增，并将扩增产物纯化，然后在Illumina公司的Hiseq2000测序平台进行测序；
5）进行生物信息分析。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：
结合Truseq试剂和NEB试剂建库方法，并对多个DNA文库同时构建。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：根据权利要求2所述的方法，其特征在于：
通过连接不同的Index接头A，构建DNA文库。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：
其所述的材料DNA来源，是植物，动物或者微生物。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：
测序平台为illumina Hiseq2000测序平台。
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