[发明专利]一种含有丹酚酸A成份的检测分析方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种含有丹酚酸A成份的检测分析方法。

背景技术

丹酚酸A(Salvianolic acid A)，又名丹酚酸甲，是唇形科植物丹参Salviamiltiorrhiza Bunge的干燥根及根茎中所含的一种水溶性酚酸类化合物，丹酚酸A对脑微血管栓塞有明显的药理作用，而且作用优于丹酚酸B(张恒艾.丹酚酸A对脑微血管栓塞大鼠的影响及机制研究[D].北京：北京协和医学院研究生院，2011〕，丹酚酸A是由丹参素和咖啡酸缩合而成，含有多个酚羟基、羟基、酯键等活泼基团，其对光和热不稳定，暴露空气易氧化成丹酚酸C和异丹酚酸C等，由于丹酚酸A的上述理化特性，丹参及丹参制剂中还含有丹酚酸A性质相近的丹酚酸B、紫草酸、迷迭香酸、丹酚酸C等化合物，因此，建立一种稳定、准确的的分析方法是非常必要的。

根据目前的文献报道，丹酚酸A的检测分析方法多采用乙睛：水：乙酸、甲酸、磷酸作为流动相。但是乙睛本身毒性较大，长期接触、吸入会导致人体呼及系统及循环系统的紊乱，且分析检测用色谱乙腈价格昂贵。

发明内容

为了克服现有技术中存在的上述缺陷，本发明提供了一种含有丹酚酸A成份的检测分析方法，

本发明提供的一种含有丹酚酸A成份的检测分析方法，其中所述含有丹酚酸A成份选自丹参药材、丹酚酸A原料或含有丹酚酸A的药物制剂，所述检测分析方法采用高效液相色谱法进行检测分析：

色谱柱：C₁₈反相色谱柱，规格：250×4.6mm，5μm；

色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流速1.0ml/min；柱温30℃；

0～10分钟时，甲醇的比例由30％升至40％，0.1～0.5％磷酸水溶液的比例由70％降至60％；

10～30分钟时，甲醇的比例由40％升至55％，0.1～0.5％磷酸水溶液的比例由50％降至45％；

30～60分钟时，甲醇的比例由55％升至80％，0.1～0.5％磷酸水溶液的比例由45％降至20％；

对照品溶液的配制：精密称取丹酚酸A对照品到容量瓶中，加甲醇溶解摇匀，并稀释至刻度；

供试品溶液的配制：精密称取或量取样品，经过处理后，放到容量瓶中，加甲醇溶解摇匀，并稀释至刻度；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，已录色谱图，按外标法以峰面积或峰高计算含量即得。

优选的，其中高效液相色谱法检测波长为286nm。

优选的，其中所述磷酸水溶液为0.10％～0.40％的磷酸水溶液。

优选的，其中所述磷酸水溶液为0.15％～0.35％的磷酸水溶液。

优选的，其中所述磷酸水溶液为0.2％的磷酸水溶液。

优选的，其中所述磷酸水溶液由体积百分比相同的甲酸或乙酸代替。

优选的，其中进一步还包括：

对照品的纯度检查及含量标化：取样品，分别采用以2∶3∶4∶0.5∶2的甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸、10∶25∶1的丙酮-36％醋酸-氨水为展开剂进行薄层色谱纯度检查，点样量分别为5、10、15、20、25μl，结果均为一个斑点；

用高效液相色谱，采用面积归一化法，如下：

色谱柱：C₁₈色谱柱，规格：250×4.6mm，5μm；

流动相：72∶28的0.2％磷酸水溶液-乙腈和

流动相：60∶40的0.2％磷酸水溶液-甲醇；

流速：1ml/min；

检测波长：286nm；

柱温：30℃；

每组流动相分别进样10μl、20μl各一次，共进样4次，测得4次平均含量为99.52％；

对照品溶液的制备：精密称取上述标化的丹酚酸A对照品10.02mg，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备溶液；

供试品溶液的制备：精密称取样品10.15mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；

测定和计算。