[发明专利]一种从桑枝中提取氧化芪三酚的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从桑枝中提取氧化芪三酚的方法。

背景技术

氧化芪三酚是一种环烯醚萜葡萄糖苷，具有多种有益的生物活性：如具有酪氨酸酶抑制活性、果蔬防腐抗菌活性、抗单纯疱疹病毒活性、抗水痘带状疱疹病毒活性及抗艾滋病病毒等活性，同时还具有抗炎消肿、抗氧化、抗细胞凋亡及神经保护等作用。

桑枝为桑科植物桑的嫩枝，桑枝占桑园年产干物质量的 64% 左右，是蚕桑资源中生物量占有比例最高的物质。然而，在传统的蚕桑生产中，少部分用作燃料，大部分桑枝条被废弃，不仅其资源价值没有得到很好开发，还污染了环境。

已知，桑枝随产地的不同而含有不同含量的氧化芪三酚（一般为 0.01‰～1‰，极少数品种能达到 1‰～4‰）。提供从桑枝中高效提取氧化芪三酚的方法将具有重要的经济和环境效益。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种从桑枝中高效提取氧化芪三酚的方法。

为解决上述技术问题，本发明采取如下技术方案：

一种从桑枝中提取氧化芪三酚的方法，其以桑枝为原料，包括依次进行的如下步骤：

（1）、用醇体积含量为65wt%~75wt%的醇水溶液对桑枝进行提取，浓缩提取液，干燥，得粗提物；

（2）、用石油醚对步骤（1）所得粗提物进行脱脂处理，之后使用乙酸乙酯多次萃取，合并乙酸乙酯萃取液，真空减压回收溶剂，得到流体状物质，40℃以下真空干燥得半成品；

（3）、将步骤（2）所得半成品用乙醇-水溶液完全溶解，与大孔树脂D101混合，吸收充分后，上柱，以乙醇-水溶液为洗脱液，进行梯度洗脱或等度分段洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，使用丙酮与石油醚的混合溶剂进行重结晶，得到氧化芪三酚晶体。

优选地，所述作为原料的桑枝为干燥的桑枝粉末。粉末大小可以为例如30~100目。

优选地，步骤（1）中，醇可以是甲醇、乙醇等常用于植物提取的醇，但优选为乙醇。所述提取可以在常温下进行。

优选地，步骤（2）中，所述真空干燥的温度为25℃~30℃。

优选地，在步骤（3）中，使用大孔树脂D101之前，对其进行预处理。预处理过程如下：先用一定量纯净水漂洗，再用95%（体积）乙醇浸泡12~36小时，然后用小流量的水淋洗，终点以流出的乙醇加水不显浑浊为标准，大量水洗净乙醇后，用2-3倍树脂体积的3-5wt%盐酸处理，水洗到接近中性，再用2-4倍树脂体积的3-5wt%的氢氧化钠处理，然后大量水洗至中性。

根据本发明的一个具体和优选方面，步骤（3）中，进行梯度洗脱，且将收集的氧化芪三酚质量分数为 40%~ 70%的洗脱液与收集的氧化芪三酚质量分数大于70%的洗脱液分别合并，浓缩，干燥以及重结晶。

根据本发明的又一具体和优选方面，步骤（3）中，进行等度分段洗脱，以10%的浓度差为一个间隔段，每段的洗脱体积为 2~3 个柱体积，洗脱液流速为 1~2 个柱体积/小时。

优选地，步骤（3）中进行重结晶时，向经过浓缩干燥后的洗脱液中，先加入纯丙酮，并加热至40℃~50℃，待溶解完全，匀速搅拌状态下加入分析纯石油醚，至溶液达到 1^o浑浊状态，加热至40℃~55℃并在该温度下静置8~12小时后过滤，结晶体用丙酮与石油醚的混合溶剂至少洗涤 2 次，过滤，抽干，真空干燥，即得。

进一步优选地，前95% 石油醚加入速度为400~500ml/min，后5% 石油醚的加入速度为100 ~ 200ml/min。

优选地，步骤（3）中，加入的石油醚的温度为40℃~50℃。

优选地，步骤（3）中，重结晶时所用丙酮与石油醚的体积比为1:2~5。

进一步地，在步骤（3）中，向重结晶过程所产生的滤液中，加少许氧化芪三酚结晶，置室温以下静置，使重复析晶和过滤结晶，至结晶不再析出，过滤，得到高纯度的氧化芪三酚晶体。