[发明专利]双峰驼PPARγ蛋白基因、重组蛋白及其克隆方法无效

专利信息
申请号: 201210478251.1 申请日: 2012-11-22
公开(公告)号: CN103014002A 公开(公告)日: 2013-04-03
发明(设计)人: 陈钢粮 申请(专利权)人: 新疆旺源驼奶实业有限公司
主分类号: C12N15/12 分类号: C12N15/12;C07K14/72;C12N15/10
代理公司: 乌鲁木齐合纵专利商标事务所 65105 代理人: 汤洁
地址: 836400 新疆维吾尔自治区*** 国省代码: 新疆;65
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摘要:
搜索关键词: 双峰驼 ppar 蛋白 基因 重组 及其 克隆 方法
【权利要求书】:

1.一种双峰驼PPARγ蛋白基因,其特征在于该基因具有SEQ ID NO.1中从核苷酸第33-2276位的核苷酸序列;其同牛、人、鼠、猪PPARγ基因编码蛋白序列同源性为95.00%,编码氨基酸序列同源性为86.00%。

2.一种根据权利要求1所述的双峰驼PPARγ蛋白基因的重组蛋白。

3.根据权利要求2所述的重组蛋白,其特征在于该重组蛋白的核苷酸序列为SEQ ID NO.1。

4.根据权利要求2或3所述的重组蛋白,其特征在于该重组蛋白具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。

5.根据权利要求2或3所述的重组蛋白,其特征在于该重组蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.2。

6.根据权利要求4所述的重组蛋白,其特征在于该重组蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.2。

7.根据权利要求2或3所述的重组蛋白,其特征在于通过设计一对引物从双峰驼PPARγ蛋白中得到双峰驼PPARγ蛋白基因,该引物对的核苷酸序列为SEQ ID NO.3 (正向)和SEQ ID NO.4(反向),序列信息如下:

SEQ ID NO.3 (正向):5’- ATGGCGTGGGACATGTGC-3’,

SEQ ID NO.4(反向):Oligo dT。

8.根据权利要求4所述的重组蛋白,其特征在于通过设计一对引物从双峰驼PPARγ蛋白中得到双峰驼PPARγ蛋白基因,该引物对的核苷酸序列为SEQ ID NO.3 (正向)和SEQ ID NO.4(反向),序列信息如下:

SEQ ID NO.3 (正向):5’- ATGGCGTGGGACATGTGC-3’,

SEQ ID NO.4(反向):Oligo dT。

9.根据权利要求5或6所述的重组蛋白,其特征在于通过设计一对引物从双峰驼PPARγ蛋白中得到双峰驼PPARγ蛋白基因,该引物对的核苷酸序列为SEQ ID NO.3 (正向)和SEQ ID NO.4(反向),序列信息如下:

SEQ ID NO.3 (正向):5’- ATGGCGTGGGACATGTGC-3’,

SEQ ID NO.4(反向):Oligo dT。

10.一种根据权利要求1所述的双峰驼PPARγ蛋白基因的克隆方法,按下述步骤进行:第一步,组织分离(Isolation);第二步,总RNA的分离(Total RNA isolation),总RNA的分离(Total RNA isolation)包括提取RNA的准备工作、组织总RNA提取、组织总RNA的鉴定;第三步,全长cDNA的克隆(Cloning of Full-length cDNA),全长cDNA的克隆(Cloning of Full-length cDNA)包括引物设计及合成、RT-PCR扩增、克隆和测序,该引物对的核苷酸序列为SEQ ID NO.3 (正向)和SEQ ID NO.4(反向),序列信息如下:

SEQ ID NO.3 (正向):5’- ATGGCGTGGGACATGTGC-3’,

SEQ ID NO.4(反向):Oligo dT。

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