[发明专利]一种改良淋球菌培养基有效
申请号: | 201210476104.0 | 申请日: | 2012-11-22 |
公开(公告)号: | CN102925533A | 公开(公告)日: | 2013-02-13 |
发明(设计)人: | 宁春华;聂晖;孟俊华;霍雨艳;崔兰兰;李福川;陈玉芹;谭坤 | 申请(专利权)人: | 济南百博生物技术有限责任公司 |
主分类号: | C12Q1/04 | 分类号: | C12Q1/04 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人: | 张贵宾 |
地址: | 250101 山东省济南市历*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 改良 淋球菌 培养基 | ||
(一) 技术领域
本发明涉及体外诊断试剂领域,特别涉及一种改良淋球菌培养基。
(二) 背景技术
淋病(Gonorrhea)是淋菌性尿道炎的简称,是由淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae)所引起的泌尿生殖系统化脓性炎症,主要通过性交传染,是目前世界范围内流行异常广泛的性传播疾病;该病可感染尿道、子宫颈内膜、也可侵犯直肠、眼结膜和咽部。女性可发生前庭大腺炎、子宫内膜炎、输卵管炎、盆腔炎;男性可发生附睾炎和前列腺炎;造成不孕或不育;并可经血行播散,引起菌血症、关节炎、心内膜炎、脑膜炎、肝炎等。
在许多过国家和地区,淋病的患病率一直居于各种性传播疾病的首位,淋球菌培养法是WHO推荐的诊断淋病的“金标准”,培养质量的关键之一是淋球菌培养基的性能,由于淋球菌的营养要求较复杂,所用的培养基中应含有动物蛋白及细菌生长所需的各种因子。目前国外常用的培养基有Thayer-Martin(T-M)培养基、NewYork City(NYC)培养基和Martin-Lewis(ML)培养基等;国内常用的是血液琼脂或巧克力琼脂培养基,这些培养基的营养成分不能很好的满足淋球菌的生长需要,培养时间长,菌落较小,不容易检出。
(三) 发明内容
本发明为了弥补现有技术的不足,提供了一种配制简单、检出率高的改良淋球菌培养基。
本发明是通过如下技术方案实现的:
一种改良淋球菌培养基,组分包括基础培养基、抗凝羊血、抑菌剂、生长因子及添加剂,各组分由以下重量份数的原料配制而成:
(1)基础培养基:胰蛋白胨3.0~5.0份,蛋白眎胨3.0~5.0份,多价蛋白胨8.0~12.0份,酵母浸膏1.0~2.0份,玉米淀粉2.0~3.0份,Nacl14.0~16.0份,K2HPO43.0~5.0份,KH2PO42.0~3.0份,琼脂14.0~16.0份;
(2)抗凝羊血10~15份;
(3)抑菌剂:万古霉素:0.003~0.005份,制霉菌素0.125~0.175份,多粘菌素0.0075~0.015份,三甲氧苄二氨嘧啶0.005~0.010份;
(4)生长因子:促生长液3份;
(5)添加剂:淋球菌增菌剂0.1~0.2份、胎牛血清8~16份;
其余为去离子水,共计10000份。
其优选的各组分的重量份数配比为:
(1)基础培养基:胰蛋白胨4.0份,蛋白眎胨4.0份,多价蛋白胨10.0份,酵母浸膏1.5份,玉米淀粉2.5份,Nacl15.0份,K2HPO44.0份,KH2PO42.5份,琼脂15.0份;
(2)抗凝羊血12.5份;
(3)抑菌剂:万古霉素:0.004份,制霉菌素0.150份,多粘菌素0.01075份,三甲氧苄二氨嘧啶0.0075份;
(4)生长因子:促生长液3份;
(5)添加剂:淋球菌增菌剂0.15份、胎牛血清12份;
其余为去离子水,共计10000份。
所述促生长液包括胱氨酸、精氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、次黄嘌呤和尿嘧啶。
鉴于淋球菌的营养要求较复杂,本发明所用的培养基中应含有动物蛋白及细菌生长所需的各种因子,并且需要在5%二氧化碳环境中培养。
与传统的淋球菌培养基相比较,本发明的培养基以淋球菌生长基础培养基为基础,还富含抗凝羊血,添加了万古霉素,制霉菌素,多粘菌素和三甲氧苄二氨嘧啶四种抗生素,特别添加了淋球菌生长必须的生长因子,如谷氨酸,半胱氨酸,胱氨酸等以及淋球菌增菌剂,使得本改良淋球菌培养基与其它类别的培养基相比营养丰富,选择性强,配制简单,培养用时短,准确性高。
本发明在基础培养基的基础上添加了多种抗生素,更好的抑制杂菌生长,增强选择性,提高检出率,适合医疗单位分离培养淋病奈瑟氏菌时一次性使用,营养丰富,性能优良,既克服了目前市场上现有淋球菌培养基的缺点,又提高了检出率,培养时间短,提高了临床工作效率,操作简单,适合各级医院使用。
(四) 具体实施方式
实施例1:以以下重量份数的组分为原料制备培养基:
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