[发明专利]具有免疫球蛋白结合能力的肽

说明书

本申请是原案申请日为2010年1月19日、原案申请号为201080014036.5(PCT/JP2010/050539)、发明名称为“具有免疫球蛋白结合能力的肽”的专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及具有免疫球蛋白结合能力的肽、以及与所述肽的融合蛋白、编码它们的核酸、制备方法、用于与免疫球蛋白结合的组合物以及手段。本发明还涉及由于Clq与免疫球蛋白的结合而引起的疾病的治疗或预防用药物组合物等，该药物组合物包含具有免疫球蛋白结合能力的肽或与所述肽的融合蛋白。

背景技术

已知Clq是补体蛋白的一种，在补体活化途径中发挥作用。例如，经典途径的活化是通过Clq与免疫球蛋白分子的Fc部分结合而引起的。

有报道称，Clq在血液中较多存在的类风湿性关节炎(RA)患者将来会出现关节破坏(非专利文献1)。可以认为这与上述的Clq的活化有关，人们希望开发Clq与免疫球蛋白分子结合的抑制剂。

有报道称，Clq与免疫球蛋白分子的结合中，ClqB亚基(B链)的精氨酸残基可能参与(非专利文献2)。但是，该报告是通过计算机模拟来预测的，实际的免疫球蛋白结合部位尚未明确。所述结合部位的详细的氨基酸序列也并未了解。

免疫球蛋白的纯化中使用Protein A或Protein G等的与免疫球蛋白特异性结合的蛋白质。但是，这些蛋白质与免疫球蛋白的结合力强，因此，一旦结合后若要分离，则必须是使用强酸性缓冲液等的严苛条件。因此，免疫球蛋白的立体结构容易破坏，无法纯化亲和性高的抗体。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：Ochi T等人.，Arthritis Rheum.1988Jan；31(1)：37～43

非专利文献2：Gaboriaud C等人.，J Biol Chem.2003Nov 21；278(47)：46974～82.Epub 2003 Sep 5

发明内容

发明所要解决的课题

本发明的解决课题在于提供：具有免疫球蛋白结合能力的肽以及与所述肽的融合蛋白、编码它们的核酸、含有所述核酸的载体等。还在于提供：不破坏抗体的立体结构、与抗原的亲和性高的抗体也可纯化的新型抗体纯化方法、以及为此的组合物和手段。

解决课题的手段

本发明人等针对上述情况进行了深入的研究，结果，成功地鉴定了参与Clq与免疫球蛋白结合的氨基酸序列，完成了本发明。还令人惊讶地发现，所述氨基酸序列并不含有被报道参与了结合的精氨酸残基。并且，含有该氨基酸序列的肽比Protein A或Protein G弱地与免疫球蛋白结合，因此消除了抗体立体结构的破坏或对纯化对象抗体的限制(无法纯化与抗原的亲和性高的抗体等)等的以往的抗体纯化时的问题，可以在温和的条件下进行抗体纯化。

即，本发明涉及以下内容：

(1)肽，该肽是具有免疫球蛋白结合能力的肽，选自

(a)具有SEQ ID NO：1～7的任意的氨基酸序列的肽；

(b)具有下述氨基酸序列的肽，其是在SEQ ID NO：1～7的任意的氨基酸序列中，缺失、置换或附加1个或多个氨基酸得到的氨基酸序列；

以及

(c)具有下述氨基酸序列的肽，其是与SEQ ID NO：1～7的任意的氨基酸序列具有66.7％以上同源性的氨基酸序列，

其中，肽中的半胱氨酸可被不同种类的氨基酸置换。

(2)(1)所述的肽，其中，肽中的半胱氨酸被丝氨酸置换。

(3)(2)所述的肽，该肽具有SEQ ID NO：28～32的任意的氨基酸序列。

(4)肽，该肽是具有免疫球蛋白结合能力的肽，选自

(a)具有SEQ ID NO：1～7的任意的氨基酸序列的肽；

(b)具有下述氨基酸序列的肽，其是在SEQ ID NO：1～7的任意的氨基酸序列中，缺失、置换或附加1个或多个氨基酸得到的氨基酸序列；

以及

(c)具有下述氨基酸序列的肽，其是与SEQ ID NO：1～7的任意的氨基酸序列具有66.7％以上同源性的氨基酸序列，

其中，肽中的氨基酸可被对应的D-氨基酸置换。

(5)(4)所述的肽，其中，所有的氨基酸均可被对应的D-氨基酸置换。

(6)(5)所述的肽，该肽具有dPro Gly dLeu dTyr dTyr dPhe所示的氨基酸序列。