[发明专利]一种(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯的高效液相色谱分析法

说明书

技术领域

本发明涉及一种高效液相色谱分析法，具体是指一种(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯的高效液相色谱分析法。

背景技术

(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯是合成瑞舒伐他汀钙的关键主原料，其结构式如下：

(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯的质量好坏直接影响其合成的瑞舒伐他汀钙的质量，进而对药物的疗效产生较大的影响。为了保证合成的瑞舒伐他汀钙的质量，需要建立一个比较完善的方法检测(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯的含量。目前未见公开的关于(3R)–叔丁基二甲硅氧基-5-氧代–6–三苯基膦烯己酸甲酯的含量及有关物质的检测方法。通过对(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯的原料及产品中实际出现的降解物质进行了详尽的研究发现：由于降解物质多，理化性质差异较大，导致了各杂质在色谱柱上表现差异较大，采用现有的等度的洗脱方法很难将各个杂质较好的分离出来，且一般液相分析方法对(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯降解产物缺少控制。

发明内容

本发明的目的主要是解决未知杂质对(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯的干扰，以及一般液相分析方法对(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯降解产物缺少控制的缺点，提供一种(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯的高效液相色谱分析法。

本发明通过下述技术方案实现：

一种(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯的高效液相色谱分析法，其特征在于，主要由以下步骤组成：

（1）取(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯原料，制成浓度为0.1～1mg/mL 的样品溶液；

（2）选取2μL～50μL的样品溶液注入液相色谱仪中；

（3）采用反相色谱柱，以甲醇和pH值为2～7的缓冲盐为流动相进行梯度洗脱，该梯度洗脱的流速为0.5ml/min～1.5ml/min、检测波长为210nm～260nm。

为了更好地分离出(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯，所述梯度洗脱中流动相的具体设置如下：

甲醇的起始比例为40%～50%；0～5min时，甲醇比例从40％上升到55％；5～45min时，甲醇比例为55％；45～55min时，甲醇比例从55％上升到90％。

为了达到更好的分离的目的，所述缓冲盐为磷酸盐缓冲液。

另外，所述磷酸盐缓冲液为磷酸二氢铵缓冲液或磷酸二氢钾缓冲液。

为了避免堵塞仪器、分离效果变差或峰保留时间发生变化的情况发生，所述磷酸盐缓冲液浓度为0.005mol/L～0.1mol/L。

进一步，所述磷酸盐缓冲液浓度为0.005mol/L～0.03mol/L。

为了避免pH过高导致主峰的峰型变差，所述缓冲盐的pH值为2.0～5.0。

优选地，所述反相色谱柱为反相C18 色谱柱或反相C8 色谱柱。

进一步，所述反相色谱柱内粒子内径为3.5μm。

优选地，所述反相色谱柱的柱温为20℃～40℃。

本发明具有以下优点及有益效果：

1、通过本发明的方法，可以同时分析(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯中的所有已知杂质，解决未知杂质对(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯的干扰，同时避免一般液相分析方法对(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯降解产物缺少控制的缺点。

2、本发明采用甲醇和pH值为2～7的缓冲盐为流动相进行梯度洗脱方法进行HPLC检测，能够更全面有效地控制(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯原料及产品中的杂质，同时对(3R)-叔丁基二甲硅氧基-5-氧代-6-三苯基膦烯己酸甲酯原料及降解产物进行有效分离，使所有杂质与主峰之间分离较好，且没有未知杂质干扰主峰，很好地控制产品的质量，进而为合成最终产品瑞舒他汀钙的质量提供保障，具有显著的进步。

3、本发明操作简单、重复性好，通过实施例具有较好的专属性。

附图说明

图1为实施例1的色谱条件图。

图2 为实施例2的色谱条件图。

图3 为最优色谱条件酸破坏图。

图4 为最优色谱条件碱破坏图。