[发明专利]准噶尔无叶豆EsDREB基因的用途无效
申请号: | 201210462537.0 | 申请日: | 2012-11-16 |
公开(公告)号: | CN102978238A | 公开(公告)日: | 2013-03-20 |
发明(设计)人: | 李小双;张道远;杨红兰;张元明 | 申请(专利权)人: | 中国科学院新疆生态与地理研究所 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;A01H5/00 |
代理公司: | 乌鲁木齐中科新兴专利事务所 65106 | 代理人: | 张莉 |
地址: | 830011 新疆维吾尔*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 准噶尔 无叶豆 esdreb 基因 用途 | ||
1.一种准噶尔无叶豆EsDREB基因的用途,其特征在于该基因用于转化植物,提高植物的多种非生物胁迫抗性,其中提高植物多种非生物胁迫抗性的方法是用准噶尔无叶豆EsDREB基因转化目标植物,获得转基因植物,具体操作按下列步骤进行:
a、用Kpn I和PstI分别酶切pMD19-T-EsDREB质粒载体和植物真核表达空载体pCAMBIA1301,回收,连接,转化大肠杆菌细胞,经质粒PCR和双酶切鉴定,将EsDREB基因构建到植物表达载体pCAMBIA1301中,得到重组质粒pCAMBIA1301-EsDREB;
b、将步骤a中的重组质粒pCAMBIA1301-EsDREB导入农杆菌中,得到带有重组质粒的农杆菌;
c、将步骤b带有重组质粒的农杆菌用叶盘转化法转化目标植物;
d、目标植物转基因阳性苗的鉴定;
e、利用转基因目标植物的体系验证EsDREB基因的抗逆功能。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于所述基因为准噶尔无叶豆EsDREB基因的核苷酸序列:
TTCTTCCTCAAATGCCTTCTGGGTCGTTCTTCTTTCGATCCAGCTTGGGATTATTTTGCCAGCAAATTAGGTATTTGTTTCAACTATTTTATTGATTGACATTTTCCCTGTATATAATAAATGAGTGCAACTTGCATGCACAAGTTAGTGAAAAATCACAACAAAGGGGATGCATCTAAGTCCCTGGCCGATACATTGGCAAGATGGAAAGAGTATAATGCCCGGCTTGAATTGAGTAATGAAGCCGAGAAGCCTGTTAGGAAAGTTCCTGCCAAGGGATCAAAAAAGGGGTGTATGAAAGGTAAAGGAGGACCCGAGAATTCGCGCTGTAACTACAGAGGTGTTAGGCAAAGGACTTGGGGCAAGTGGGTTGCTGAGATTCGAGAGCCAAACAGAGGGAATAGGCTCTGGTTGGGGACGTTTTCGAATGCAGTTGGCGCTGCTCTTGCTTATGATGAAGCTGCAAGGGCAATGTATGGTTCTTGTGCGCGCCTCAACTTTCCCAATGTACAAGTTTCCAATTTCTCTCAGCTGGAAGCTTCAAAAGCTTCTCCAGCCGGCTCTGCGATGGTAATATCAGAGAATACCGAGTCCATGATATTGCCAAACAACTCGGGGGTAGATGCAACTGAAGATGTTGACATGGAACGTCTTTCATTATCGCTAAGCGTGGCTGTGAATCATGAGGAAGGGGAGGGTGACTCAGGGTCAGGGACCAGTTCCTCCGATCCTTCATTGTCTTGATGTAAGTTTTGCAT
EsDREB基因的氨基酸序列:
MSATCMHKLVKNHNKGDASKSLADTLARWKEYNARLELSNEAEKPVRKVPAKGSKKGCMKGKGGPENSRCNYRGVRQRTWGKWVAEIREPNRGNRLWLGTFSNAVGAALAYDEAARAMYGSCARLNFPNVQVSNFSQLEASKASPAGSAMVISENTESMILPNNSGVDATEDVDMERLSLSLSVAVNHEEGEGDSGSGTSSSDPSLS。
3.根据权利要求1所述的用途,其特征在于多种非生物胁迫抗性为抗干旱胁迫,抗高盐胁迫,抗冷胁迫,抗热胁迫。
4.根据权利要求1所述的用途,其特征在于步骤c目标植物为烟草。
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