[发明专利]林可霉素发酵用复合蛋白粉

说明书

技术领域

本发明属于微生物发酵技术领域，具体的说，本发明涉及一种林可霉素发酵用复合蛋白粉。

背景技术

自20世纪60年代发现林可霉素(lincomycin)以来，林可霉素的发酵产率有了大幅度的提高。但是，一般企业生产过程中普遍存在发酵中后期菌丝断裂严重并提前发生自溶的问题，大大影响了林可霉素的生物合成速率以及有效生物合成时间。研究表明，高浓度游离氨基氮和溶解磷能促进细胞的生长和繁殖，可以缩短菌体繁殖所需要的时间，而同时又抑制许多抗生素的生物合成，对工业生产具有重要的指导意义。中国专利申请CN101092597A公开了一种生产林可霉素用复合培养基，其发酵液林可霉素生物效价在7200单位/毫升左右。林可霉素及其衍生物依然是临床上使用量较大的抗生素，因此，亟需解决目前林可霉素发酵生产中存在的问题提高发酵单位。

发明内容

本发明针对林可霉素发酵过程中菌丝提前自溶而影响产物生物合成的问题，根据林可霉素的代谢特性，采用多种动植物蛋白复配并筛选得到一种复合蛋白粉，经200L发酵罐验证发酵单位可达至9561μg/ml，具有很好的应用价值。

因此，本发明目的在于提供一种林可霉素发酵用有机蛋白粉，以利于提高林可霉素的发酵水平。

本发明提供的复合蛋白粉由多种动植物蛋白复配并筛选得到，该复合氮源含有丰富的蛋白质、氨基酸、植物多糖、维生素及核酸。

本发明的林可霉素发酵用复合蛋白粉的特征在于，其由以下质量百分比的组分组成：20％～25％的冷榨黄豆粉、15％～30％的花生饼粉、10～25％的棉籽蛋白粉和20％～55％的鱼粉。

根据本发明一个优选的实施方式，林可霉素发酵用复合蛋白粉由以下质量百分比的组分组成：20％～25％的冷榨黄豆粉、20％～25％的花生饼粉、15～20％的棉籽蛋白粉和35％～40％的鱼粉。

本发明中所述复合蛋白粉总氮含量为52.5％-55.5％、氨基氮含量为12.5％-14.5％、总磷含量为1.6％-1.9％.

本发明的复合蛋白粉能够显著减缓菌丝自溶和提高林可霉素的生物合成速率，从而提高发酵效价。经200L发酵罐验证发酵单位可达至9561μg/ml，大幅领先目前国内的平均水平，具有很好的应用价值。

附图说明

图1为如实施例1所述不同种类氮源对林可霉素发酵效价的影响；

图2为如实施例4所述发酵罐中不同氮源对林可霉素发酵效价的影响；

图3为如实施例4所述不同含量的复合蛋白粉发酵168h时的菌丝形态。

具体实施方式

以下结合具体的实施例，对本发明做进一步说明。以下实施例仅用于说明本发明，并非用于限定本发明的范围。

本发明中所用的原料来源如下：冷榨黄豆粉、花生饼粉、棉籽蛋白粉、鱼粉、玉米浆、泡敌、硅油等购自河南天方药业股份有限公司；可溶性淀粉购自国药集团化学试剂有限公司；葡萄糖购自上海西王淀粉糖有限公司；其余试剂均购自国药集团化学试剂有限公司。

菌种：林可链霉菌Streptomyces lincolnensis SIPI-A.2118，由河南省天方药业有限公司提供。

斜面培养基(g/L)：可溶性淀粉20，冷榨黄豆粉5，K₂HPO₄0.5，NaCl0.5，KNO₃1，MgSO₄·7H₂O0.5，FeSO₄·7H₂O0.01，琼脂22，pH7.0～7.5；121℃灭菌30min。

种子培养基(g/L)：可溶性淀粉20，葡萄糖15，冷榨黄豆粉20，玉米浆25，(NH₄)₂SO₄2，CaCO₃4，pH6.5～7.5；121℃灭菌30min。

原始摇瓶发酵培养基(g/L)：淀粉15，葡萄糖65，冷榨黄豆粉25，玉米浆15，(NH₄)₂SO₄8，NaNO₃8，NaCl5，KH₂PO₄0.2，CaCO₃8，pH6.5～7.5；121℃灭菌30min。