[发明专利]一种黄花蒿等中药材及含青蒿素成分样品中青蒿素含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种青蒿素含量的简易测定方法，尤其是涉及一种黄花蒿等中药材及含青蒿素成分样品中青蒿素含量的测定方法。

背景技术

青蒿素是上个世纪70年代由我国科学家从黄花蒿中分离出的一种活性单体成分，在治疗脑型疟、恶性疟、间日疟等疾病方面具有高效、低毒、速效、使用安全等优点，是目前防治疟疾的首选药物及WHO推荐的抗疟药物。由于青蒿素类药物是抗疟的特效药物，与氯喹类抗疟药物相比具有成本低廉的优势，具有很可观的市场前景。因此，针对青蒿素的含量测定方法研究也得到了广泛的关注，并开发出了一系列的青蒿素含量测定方法。其中，药品中青蒿素的含量的常用测定方法是紫外可见光谱法和高效液相色谱法，这也是《中国药典》收录的含量测定方法。

紫外可见光谱法检测青蒿素的原理和方法大致相同。以青蒿素的含量测定为例：通过使用NaOH处理青蒿素乙醇溶液30分钟，使青蒿素反应生成在292nm波长处有明显吸收的衍生物，对衍生物在292nm波长处的吸光度进行测量并通过标准曲线法计算出相应的青蒿素含量。该方法操作简单，使用的仪器-紫外可见光谱仪也较为普遍。但是，由于在含量测定前必须先进行衍生化，并且在实际测量中，特别是测定复方制剂中青蒿素类药品或者植物提取液中的青蒿素的含量时，往往会因为其它杂质在292nm波长处有吸收而导致测定结果不准确。

高效液相色谱法（HPLC）是目前广泛使用的青蒿素类药物含量测定方法之一，《中国药典》中通常将样品溶解后直接进样，以外标法测定青蒿素类药物的含量。需要注意的是，在测定药物中或植物提取物中的青蒿素含量时，虽都可以采用HPLC法，但使用的检测器不同，实验方法也有差别。在使用紫外（UV）检测器时，需将青蒿素类药品进行柱前衍生化，然后再进行测定。青蒿素与碱反应后生成292nm处有吸收的物质，之后将其在pH5.6-6.0定量转化为最大吸收波长在260nm处有吸收的物质，再进行HPLC测定。或者使用其它检测器，如蒸发光散射检测器（ELSD），质谱（MS）进行检测。HPLC法准确可靠、重现性好、专属性强，可广泛用于药物原料、制剂及生物样品中青蒿素含量的分析。由于使用HPLC-UV法进行含量测定时需对样品进行柱前衍生化处理，若使用其它检测器则较为昂贵。并且HPLC法进行含量测定时还需要用到标准对照品。从而使得HPLC法检测青蒿素类药物成本较高。

由于紫外可见光谱法和HPLC法都需要用到专业仪器设备，并且在样品测试前需要进行复杂的前处理过程，进行样品含量测定时需花费较多时间，特别是HPLC法，测定单个样品耗时更多。因此，这两种常用的方法都不适宜大批量样品的含量测定，特别是对样品含量的测试精度要求不高的时候。目前还没有一种测量快速、同时低成本的青蒿素的检测方法。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种方法独特、测量快速、同时低成本的一种黄花蒿等中药材和青蒿素原料药等含青蒿素成分样品中青蒿素含量的测定方法。

本发明通过如下方式实现：

一种黄花蒿等中药材及含青蒿素成分样品中青蒿素含量的测定方法，其特征在于：该方法为先将所测样品溶于有机溶剂或以有机溶剂提取出其中的青蒿素制成待测样品溶液，然后在一个50 mL锥形瓶中加入0.1-4 g 的NaHCO₃ 、1-5倍NaHCO₃量的冰醋酸、5-20 mL乙醇、0－10mL蒸馏水、1-100倍待测样品中青蒿素成分含量的KI、0.5-5mL 浓盐酸，之后加入确定体积的待测样品溶液，将混合溶液在5-100℃水浴加热反应0-24小时后，将其冷却，最后以淀粉为指示剂，用Na₂S₂O₃标准溶液进行滴定至终点，通过公式计算得出样品中青蒿素的含量；

所述公式为m(样品中青蒿素质量) = (N*V*282)/2，其中，N为Na₂S₂O₃标准溶液的物质的量浓度，V为消耗Na₂S₂O₃标准溶液的体积，282为青蒿素的摩尔质量；

所述有机溶剂为石油醚或乙醇；

所述NaHCO₃为0.3-2 g；

所述冰醋酸为NaHCO₃物质的量的2-4倍；

所述KI为待测样品中青蒿素物质的量的6-10倍；

所述反应水浴为45-70 ℃，加热时间为10-60 min。