[发明专利]4-[6-（4-异丙氧基）吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉在制备自噬抑制剂或肿瘤增敏药物中的用途

说明书

技术领域

本发明涉及4-[6-（4-异丙氧基）吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉的一种新用途，具体涉及4-[6-（4-异丙氧基）吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉在制备自噬抑制剂或肿瘤增敏药物中的用途。本发明属于生物医药领域。 

背景技术

细胞自噬(autophagy)是细胞内一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后，转入溶酶体中进行降解并得以循环利用的过程。自噬是十分重要的生物学现象，参与生物的发育、生长等多种过程。目前发现的自噬诱导剂主要有1）Bredeldin A/Thapsigargin/Tunicamycin；2）Carbamazepine，Lithium Chloride（氯化锂），3）Earle's平衡盐溶液，4）N-Acetyl-D-sphingosine，5）Rapamycin，6）Xestospongin B/C；自噬抑制剂主要有1）3-Methyladenine（3-MA）；2）BafilomycinA1；3）Hydroxychloroquine。目前阐明确切机制的自噬抑制剂较少，需要发现新型自噬抑制剂，为自噬研究提供新的研究工具。此外，在肿瘤细胞中，自噬是细胞对外界压力的一种反应，是一种细胞的自我保护机制，自噬抑制剂可增加抗肿瘤药物的敏感性，增强抗肿瘤作用，因此发现新型自噬抑制剂也为抗肿瘤治疗提供新的手段。 

发明内容

本发明的目的之一是提供4-[6-（4-异丙氧基）吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉（式I所示，英文名称：4-[6-(4-Isopropoxyphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-yl]quinoline或4-[6-[4-(1-Methylethoxy)phenyl]pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-yl]-quinoline）在制备自噬抑制剂中的应用； 

本发明的目的之二是提供1、4-[6-（4-异丙氧基）吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉在制备肿瘤增敏药物中的应用。 

为了达到以上目的本发明采用了以下技术手段： 

本发明通过研究发现了4-[6-（4-异丙氧基）吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉具有抑制饥饿诱导的，AICAR（5-Aminoimidazole-4-carboxamide 1-β-D-ribofuranoside）诱导的和Rapamycin（雷帕霉素）诱导的自噬作用,并阐明其是通过激活Akt-mTOR信号通路实现的，因此本发明提出了4-[6-（4-异丙氧基）吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉、其药学上可接受的盐或以其为基础进行改造后的，仍具有自噬抑制作用的类似物在制备自噬抑制剂中的应用；其中4-[6-（4-异丙氧基）吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉的化学结构式如式I所示： 

在本发明具体实施例中，所述的自噬是通过饥饿、AICAR或Rapamycin诱导的。 

进一步的研究发现，1、4-[6-（4-异丙氧基）吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉还具有增强他莫昔芬（tamoxifen）的抗乳腺癌细胞（MCF-7肿瘤细胞）的作用。 

因此，进一步的，本发明提出了1、4-[6-（4-异丙氧基）吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉、其药学上可接受的盐或以其为基础进行改造后的，仍具有自噬抑制作用的类似物在制备肿瘤增敏药物中的应用；其中4-[6-（4-异丙氧基）吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉的化学结构式如式I所示： 

在本发明具体实施例中，所述的肿瘤增敏药物具有增加他莫昔芬的抗乳腺癌细胞的作用。 

附图说明

图1为MCF-7细胞无糖饥饿24小时后加入4-[6-（4-异丙氧基）吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉LC3-II表达检测结果； 

图2为MCF-7细胞AICAR处理24小时后加入4-[6-（4-异丙氧基）吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉LC3-II表达检测结果； 

图3为MCF-7细胞Rapamycin处理24小时后加入4-[6-（4-异丙氧基）吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉LC3-II表达检测结果； 

图4为MCF-7细胞无糖饥饿24小时后加入4-[6-（4-异丙氧基）吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]喹啉Akt和mTOR表达检测结果； 

图5为通过MTT法测定细胞活力的统计结果。