[发明专利]弗霉素B及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明属医药领域，涉及具有生物活性的新物质弗霉素B(Fradimycin B)及其制备方法，以及在制备抗菌和抗肿瘤药物中的用途。 

背景技术

感染性疾病依然严重危害人类的健康和生命，全球每年有超过1700万人死于感染性疾病。金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)是人类的一种重要病原菌，可引起许多严重感染。而且，随着抗生素的广泛应用，不断出现的耐药病源菌，特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐万古霉素肠球菌(VRE)等超级耐药菌的感染，已成为医院和社区感染更为棘手的重要问题。我国是世界上抗生素使用最多的国家之一，耐药菌感染性疾病的危害更为突出，是我国10种重大疾病之一。 

而恶性肿瘤(癌症)对人类危害就更加严重，为当今世界死亡率最高的疾病，也是我国城乡居民的第一死因。化疗是目前世界上肿瘤手术切除后药物治疗的主要方法，但毒性大疗效有限。虽然分子靶向药物为癌症的治疗开辟了新途径，但其临床效果未达到预期效果，而且癌细胞对抗癌药耐药性的不断增加也严重影响现有药物的疗效。 

综上所述，临床上需要研究开发治疗感染性疾病和恶性肿瘤的新型药物。 

本发明发现了一种新的生物活性物质弗霉素B (Fradimycin B)。由于弗霉素B不仅对金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)具有显著的抗菌活性，而且可显著抑制肠癌HCT-15和SW620细胞以及胶质瘤C6细胞的生长，所以，弗霉素B在制备抗感染和抗肿瘤药物等方面具有良好的应用前景。 

发明内容

本发明的目的是提供一种生物活性物质弗霉素B(Fradimycin B)，所述的弗霉素B为一新化合物，它的化学结构式为： 

本发明的另一个目的是提供弗霉素B的制备方法，通过以下步骤实现：

（1）弗霉素B产生菌Streptomyces fradiae PTZ0025的培养分离

取空气干燥的海洋沉积物用液体菌种培养液稀释，稀释后的浓度为0.1~0.0001 g/ml,取一定量的样品稀释液均匀分散到含有固体培养基的培养皿中，在常温条件下培养一定时间后,将不同的菌落分别转移到另一含有固体培养基的培养皿中，在常温条件下继续培养一定时间。最后将生长良好的单一菌落(菌株PTZ0025)转移到斜面培养基并置于4°C冰箱保存备用。菌株弗氏链霉菌Streptomyces fradiae PTZ0025已经保藏在中国典型培养物保藏中心-武汉中心(保藏编号CCTCC NO：M2012374)；保藏日期：2012年9月24日，保藏地址：中国武汉武汉大学。

所述的海洋沉积物是从浙江普陀海岸边获得；所述的液体菌种培养液每100ml的组成为：5.0克葡萄糖、1.5克丙三醇、1.5克麦芽提取物、2.5克酵母提取物、0.5克酪蛋白氨基酸和0.1克碳酸钙,或是适宜菌株PTZ0025生长的其它组成的液体培养基。样品稀释液的取样量为50~300 ml。培养皿所含的固体培养基为细菌琼脂(Bacto-agar)培养基或其它固体培养基。培养温度为常温下的20~30°C；培养时间为7~15天。斜面培养基为高氏合成斜面培养基或其它固体斜面培养基。 

（2）弗霉素B产生菌Streptomyces fradiae PTZ0025的菌种鉴定 

步骤（1）所获得的菌株用目前实验室普遍使用的16S rDNA序列分析方法鉴定细菌PTZ0025的种类，确定为菌株弗氏链霉菌，分类命名为Streptomyces fradiae PTZ0025，已被武汉中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号CCTCC NO：M 2012374。

（3）弗霉素B产生菌Streptomyces fradiae PTZ0025发酵菌液的制备 

取弗氏链霉菌Streptomyces fradiaePTZ0025的菌落与一定量的灭菌水在微量离心管混合后匀浆，将细菌匀浆液转移到含有一定量液体菌种培养液的小锥形瓶中，将含有PTZ0025的菌种培养液在一定温度条件下旋转振摇培养一定时间后，再转入含有液体培养基的大三角培养瓶，在常温下旋转振摇发酵培养一定时间后，得到具有抗菌活性的PTZ0025发酵菌液。