[发明专利]一种复合生长因子及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种血小板来源复合生长因子，其特征在于，是以浓度800×10⁹-1500×10⁹/L的血小板为原料首先通过S/D法病毒灭活后加入钙剂或/和凝血酶激活形成血小板凝胶，得到的上清。

2.根据权利要求1所述的复合生长因子，其特征在于，是以最佳浓度1000×10⁹/L的血小板为原料首先通过S/D法病毒灭活后加入钙剂或/和凝血酶激活形成血小板凝胶，得到的上清。

3.根据权利要求1所述的复合生长因子，其特征在于，所述复合生长因子中包含血小板衍生生长因子（PDGF）、血管内皮生长因子（VEGF）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、表皮生长因子（EGF）和类胰岛素样生长因子-1（IGF-1）。

4.根据权利要求1或2所述的复合生长因子，其特征在于，所述钙剂为CaCl₂或葡萄糖酸钙。

5.根据权利要求1或2所述的复合生长因子，其特征在于，所述凝血酶为人血凝血酶。

6.根据权利要求1-3任一项所述复合生长因子在制备治疗急性创伤、烧伤、整形美容、慢性难愈合伤口药物中的应用。

7.一种复合生长因子凝胶，其特征在于，是由权利要求1-3任一项所述的复合生长因子添加壳聚糖微球、增稠剂、蛋白稳定剂、保湿剂、PH调节剂、抑菌剂和水等物质加工形成的。

8.根据权利要求1-3任一项所述的复合生长因子，其制备方法为：

（1）血小板浓缩液的病毒灭活：采用S/D法病毒灭活对血小板浓缩液（PC）进行病毒灭活处理；

（2）去除病毒灭活处理后的血小板浓缩液中的有机溶剂/去污剂混合物（S/D溶液）；

（3）血小板浓缩液的激活：处理后的血小板浓缩液中加入钙剂或/和凝血酶激活，将混合物旋转混合，形成血小板凝胶，至上清恢复，即得复合生长因子。

9.根据权利要求7所述的复合生长因子凝胶，其制备方法为：

（1）制备空白壳聚糖微球；

（2）精确称取空白壳聚糖微球，置于EP管中，加入乙酸缓冲液及富含血小板生长因子的溶液，充分振荡均匀，超声振荡，置于4℃、135rpm的摇床，6h后离心并用纯水洗涤，微球沉淀，冷冻冻干，得到壳聚糖复合生长因子缓释微球；

（3）取80%重量的纯化水，加入氯化钠、抑菌剂，加热使溶解；

（4）将上述溶液放在室温，加入PH调节剂，使其溶解；

（5）在上述溶液中加入氢氧化钠、增稠剂，溶胀过夜，高压灭菌，得凝胶A；

（6）将步骤（2）所制备的壳聚糖复合生长因子缓释微球精确称重后，放在EP管中，加入PBS缓冲液中，充分振荡，使其充分溶胀，然后加入保湿剂、蛋白稳定剂，搅拌使其溶解，微孔滤膜过滤后得混合溶液B；

（7）将混合溶液B与凝胶A混合，搅拌均匀，调节PH值到6.5~7.5；

（8）加入余量的纯化水，灭菌，即得复合生长因子凝胶剂。

10.根据权利要求7或9所述的复合生长因子凝胶在制备治疗急性创伤、烧伤、整形美容、慢性难愈合伤口药物中应用。