[发明专利]一种恶臭假单胞菌用培养基无效

专利信息
申请号: 201210432500.3 申请日: 2012-11-02
公开(公告)号: CN102888378A 公开(公告)日: 2013-01-23
发明(设计)人: 郭峰波;贾万利;李颖 申请(专利权)人: 中北大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12R1/40
代理公司: 太原华弈知识产权代理事务所 14108 代理人: 李毅
地址: 030051*** 国省代码: 山西;14
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摘要:
搜索关键词: 一种 恶臭 假单胞菌用 培养基
【说明书】:

技术领域

发明属于微生物培养技术领域,涉及一种微生物培养基,特别是涉及一种用于培养恶臭假单胞菌的培养基。

背景技术

硝基苯是化工行业的基本原料之一,主要应用于炸药、农药、染料等有机合成工业。由于硝基苯在水中具有较高的稳定性,一旦进入水体,就会造成水体较长时间的污染,另外,硝基苯毒性较强,不仅能够造成环境污染,而且一旦人吸入硝基苯蒸汽,还会引起急性中毒等。目前对硝基苯废水的处理方法主要有物理法、化学法和生物法。化学法和物理法处理硝基苯废水较多,但普遍存在二次污染和处理效果不理想等问题。生物法,特别是利用微生物处理该类废水是目前研究的热点。

有关硝基苯降解菌的研究已有文献报道,孙凌等(活性炭固定耐冷菌对硝基苯的降解特性,中国环境科学,2009,29(9):941–945)用活性炭固定恶臭假单孢菌(Pseudomonas putida)进行了硝基苯的降解研究。李明堂,徐镜波,卢振兰,等(两株细菌对邻氯硝基苯的协同降解[J],环境科学学报,2010,30(6):1138–1143)研究结果表明Pseudomonas putida也可以降解对邻氯硝基苯。王琦等(硝基苯降解菌的筛选驯化及其最适降解条件研究,广东化工,2009,36(11):216–219)研究表明,随着硝基苯浓度升高,短杆菌属细菌对其降解效率降低,硝基苯浓度为500mg/L时,去除率仅为82%。王书航等(硝基苯降解菌筛选和鉴定,合肥工业大学学报,2008,31(11):1751–1754)研究表明,假单孢菌对初始质量浓度为25mg/L的硝基苯溶液经过168h培养,降解效率为81.86%。王松等(硝基苯微生物降解的优化条件研究)研究了硝基苯初始浓度、pH值、重金属和NaCl浓度对硝基苯降解率影响,结果表明硝基苯的初始体积比为1000μL/L,pH=8,NaCl质量浓度50mg/L,ZnCl2质量浓度50mg/L时,硝基苯降解率可达72.9%。

但是,上述报道均存在微生物作用时间较长,降解效率不高,微生物对硝基苯的耐受性较低等问题。上述问题的本质是微生物数量少,培养条件差造成的。其原因是现在针对培养基的研究主要集中在菌种生长所需碳源、氮源和无机盐等常规营养元素上,并未考虑到培养基中假单孢菌生长过程中所需要的限制成份。

发明内容

本发明的目的是提供一种恶臭假单胞菌用培养基,以本发明的培养基培养出的恶臭假单胞菌培养时间快,生长速度快、菌株耐受性高,适应能力强。

每1000mL本发明的恶臭假单胞菌用培养基中,各组分的含量分别为:

牛肉膏7~13g,尿素2~5g,磷酸氢二钾2~3g,磷酸二氢钾0.5~2g,氯化钙0.3~1.2g,硝酸钠3.4~5.6g,微量元素和生长因子溶液1~5mL,去离子水余量。

其中,所述的微量元素和生长因子溶液中含MoSO4 2.4~3.6mmol/L,CuCl2 1.5~2.8mmol/L,ZnCl2 3.0~4.0mmol/L,FeSO4 4.2~4.8mmol/L,尿嘧啶15~21mmol/L,VB6 20~35mmol/L,L-色氨酸30~50mmol/L。

本发明制备得到的培养基的pH值范围调节为7.5~8.2。

进一步地,每1000mL本发明的恶臭假单胞菌用培养基中,各组分的含量分别为:

牛肉膏8.6~10.8g,尿素2.3~4.6g,磷酸氢二钾2.2~2.7g,磷酸二氢钾0.6~1.7g,氯化钙0.4~1.0g,硝酸钠3.4~4.3g,微量元素和生长因子溶液1mL,去离子水余量。

优选地,每1000mL本发明的恶臭假单胞菌用培养基中含有牛肉膏10g,尿素4.2g,磷酸氢二钾2.96g,磷酸二氢钾0.84g,氯化钙0.8g,硝酸钠4g,微量元素和生长因子溶液1mL,去离子水余量。

将恶臭假单胞菌株接入本发明的培养基,于27~32℃,摇床转速120~150r/min下培养12~24h,即可得到高浓度铜绿假单孢菌液。

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