[发明专利]重组抗人CD4嵌合抗体

说明书

技术领域

本发明属于抗体药物技术领域，具体涉及一种针对人T细胞表面CD4分子的重组人/鼠嵌合抗体及其编码基因。

背景技术

人CD4分子是一类分子质量约为55 kDa的单链跨膜糖蛋白，属免疫球蛋白超家族，主要表达于部分T细胞、胸腺细胞、某些B细胞和EB病毒转化的B细胞、单核-巨噬细胞以及特定区域的脑细胞表面。其在T细胞发育、成熟T细胞的活化以及信号转导中发挥重要作用，是适应性免疫应答发生的重要效应分子，在维护机体正常生理功能中作用巨大。然而，当CD4分子的正常免疫学功能失调或遭到破坏时即可能导致疾病。因此，CD4分子成为许多疾病治疗的靶标，如移植排斥反应、类风湿性关节炎、Crohn′s病、多发性硬化症、肿瘤、Sjogren综合症、银屑病、哮喘、特应性皮炎、自身免疫性糖尿病以及AIDS和HIV的感染等。

鉴于此，国外多个单位对抗人CD4抗体的治疗效果进行了广泛而深入的研究，如预防HIV感染(Kuritzkes DR, Jacobson J, Powderly WG, et al. JID, 2004, 189: 286-291.)以及哮喘(Kon OM, Sihra BS, Compton CH, et al. Lancet, 1998, 352: 1109-1113.)、关节炎(Pelegri C, Morante MP, Castellote C, et al. Clin Exp Immunol, 1996, 103: 273-278.)、多发性硬化症(Oosten BW van, Lai M, Hodgkinson S, et al. Neurology, 1997, 49: 351-357.)、T细胞淋巴瘤(Knox S, Hoppe RT, Maloney D, et al. Blood, 1996, 87 (3): 893-899.)、寻常性银屑病(Skov L, Kragballe K, Zachariae C, et al. Arch Dermatol, 2003, 139: 1433-1439.)和器官移植(Motoyama K, Arima T, Yu S, et al. Transplantation, 2000, 69(2): 285-293.)的治疗和预防等。其抗体类型包括嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体。其中Biogen IDEC/GSK合作开发的嵌合抗体clenoliximab正在开展治疗哮喘和类风湿性关节炎的II期临床研究；Centocor Inc.开发的嵌合抗体priliximab正在开展治疗Crohn's病的II期临床研究；Orthclone开发的人源化抗体cedelizumab正在开展治疗自身免疫病和器官移植排斥的II期临床研究；Tanox Inc.公司开发的人源化抗体ibalizumab正在开展治疗AIDS/HIV感染的II期临床研究；而Medarex和Genmab公司合作开发的全人源抗体zanolimumab已经完成治疗皮肤T细胞淋巴瘤III期临床研究，并已获得了FDA和EMA孤儿药的批准，由于商业原因现为美国EmergentBiosolution公司开发产品。

然而，我国在相关领域的研究仍处于空白，究其根本原因是缺乏具有自主知识产权的抗人CD4抗体的核酸序列以及缺乏重组抗体高效表达技术平台。因此，本领域急需一种具有自主知识产权的且具有实用价值的抗人CD4抗体，以及相关高效表达技术。

WuT4是我所20世纪80年代自主研发的抗人CD4分子IgG2a小鼠单抗，起初作为人T淋巴细胞分群试剂(国药准字S10930009)为HIV感染等诊断提供方案。然而，由于鼠源性单克隆抗体用于人体易导致抗鼠抗体反应(Human anti-mouse antibody, HAMA)而降低疗效，且半衰期短，反复应用能导致超敏反应以及不能发挥抗体Fc段生物学功能等缺点而一度限制其临床使用。为此，往往采用重组DNA技术将小鼠单抗改造成人鼠嵌合抗体以提升其临床应用效果。迄今获FDA或EMA批准的嵌合抗体有5种(Abciximab, Rituximab, Basiliximab, Infliximab, Cetuximab)，其中Infliximab、Rituximab和Cetuximab均为重磅炸弹药物，2010年的销售额分别为80、67和32亿美元。此外，还有一种嵌合抗体类药物Brentuximab vedotin正在接受EMA审评。