[发明专利]面膜复合活性物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于日用品领域，特别涉及面膜的制备工艺。

背景技术

面膜是人们日常生活中最常使用的化妆品之一。对人体面部皮肤起到补充水分是目前的面膜产品最有保障的功能。然而人们更期待解决的问题是面膜能够促进人体面部皮肤的新陈代谢，起到美容作用。为此，需要研制一种具有皮肤营养作用的面膜，其中的主要活性物质是面膜能否达到预期效果的关键。

目前，面膜制备工艺主要存在如下问题：1)面部皮肤的感染：人体面部皮肤在诸如去“死皮”，挤“暗疮”等日常护理操作，都有可能导致表皮结构乃至腺体结构不同程度的物理损伤，并导致不同程度的炎症反应。所以消炎和预防感染是面临的首要问题。2)面部皮肤的吸收：面部皮肤具有一定的吸收功能，但是仅限于小分子物质，对于大分子量的蛋白类物质没有吸收作用。特别对于蛋白质的降解产物(如氨基酸，小分子多肽等分子量较小的物质)具有一定的吸收作用。所以，面膜功效成分采用非小分子物质将导致吸收困难。3)生物活性物质的价格问题：生物活性物质主要是指生长因子类物质。生长因子类物质的促组织修复和增强细胞活力的功能是不容置疑的，在美容护肤产品中添加生长因子类物质无疑会起到很好的美容护肤效果。但是，此类物质极其昂贵，每毫克干粉的平均售价为近万元人民币左右。另外，需要指出的是：人体面部皮肤美容保健的实质是促进新的表皮细胞迅速有序地替代坏死表皮细胞，以促进表皮更新的过程。这一过程的实现，需要多种生长因子类物质的协同作用，这些物质有已知的，也有未知的。而现有面膜制剂片面地强调单因素的作用，忽略了多种生长因子的协同作用，但过多的生长因子又可能增加皮肤过敏的风险。

细胞培养液余液是指细胞原代培养过程中更换下来的培养液。本发明中特指哺乳动物的细胞培养余液；原代培养是泛指非细胞株或细胞系的细胞培养。在细胞培养过程中，培养液主要由两个部分构成。一是基础培养基，如DMEM等，主要为细胞的生长提供能量来源如葡萄糖、适宜的pH值及渗透压、以及其他无机条件；二是血清，如胎牛血清、类胎牛血清、小牛血清等；它们除了提供细胞生长的有机营养外，还提供指导细胞生长的生长因子类物质。含不同浓度血清的基础培养基被称为完全培养基。在细胞培养过程中，由于物质(主要是葡萄糖)的消耗，培养基中的指示剂会由红色变为透明的浅黄色，此时，则意味着必须更换新的完全培养基。在细胞的培养中，除了人工制备的完全培养基成分外，被培养的细胞会根据一些目前人们还未彻底了解的一些原理和信号通路分泌一些特定浓度的生长因子类物质。这些物质的分泌种类及其分泌量以及浓度控制的双向反馈机制，目前，人们还没有完全掌握。但是，可以确定的是，在细胞培养过程中，细胞会向培养基中分泌多种酶类以及生长因子类物质，这些物质以适宜的生理浓度存在，对细胞的生长和类似在体条件下功能的表达起协同调节作用。这些即将被倾倒的培养基与新鲜完全培养基相比，有机成分，如葡萄糖、蛋白质等被大量消耗，但是却富集了很多种类的酶类及生长因子类物质，所以，它们是提取生长因子类物质的最佳原料。正是由于这一原因，国外有报道称，成功利用原代培养牛血管内皮细胞培养液余液，添加到原代培养的人包皮来源微血管内皮细胞的培养基中，成功实现了体外诱导微血管内皮细胞形成微血管。但是，目前还没有关于细胞培养余液制备面膜活性成分的研究。

发明内容

本发明的目的之一在于提供绌胞培养余液的一种新应用，该应用以细胞培养余液中含有的多种生长因子类物质作为面膜的活性物质，为面膜制备提供了新的思路。

为实现上述目的，本发明的技术方案是：

哺乳动物细胞的原代培养余液在制备面膜活性物质中的应用。哺乳动物细胞原代培养余液具体是指哺乳动物细胞原代培养过程中更换下来的培养液，这里所指的“原代培养”是泛指非细胞株或细胞系的细胞培养；哺乳动物细胞原代培养余液中含有多种已知和未知的生长因子类物质，这些物质都以生理浓度存在，与市售的生长因子类物质昂贵的价格相比，价廉物美。