[发明专利]一种联合治疗肿瘤的基因药物及其应用

说明书

技术领域

本发明属于基因治疗领域，具体涉及一种联合治疗肿瘤的基因药物及其应用。

背景技术

肿瘤的快速增殖和恶性转移得益于肿瘤新生血管的生成增加以及肿瘤细胞的凋亡减少等多种因素的影响。针对各种因素相应通路中的关键基因或靶标蛋白正越来越多被科学家们研究并成功应用于临床。但是，在大多数情况下，机体对肿瘤治疗的反应是无效和微弱的。其主要原因在于恶性肿瘤的发生发展是一个长期的、多阶段的、多基因改变累积的过程，肿瘤在与机体的对抗和选择过程中受多种信号通路的影响，单一的改变某一个基因或某一条信号通路往往难于取得令人满意的效果。因此，通过同时调控肿瘤中多条信号通路的多个基因来研究抑制肿瘤生长增殖情况，对于明确肿瘤的发生和发展以及开展合理的治疗方案均有着重要的意义。

近年来，对新生血管生成与肿瘤生长、侵袭及转移等的关系进行了深入研究，肿瘤血管新生对于肿瘤的生长、转移具有重要作用。Pepper（Arterioscler Thromb VascBiol.1997,17(4):605）的研究表明，实体瘤的生长、发展可分为血管前期和血管化期。在肿瘤形成的早期，瘤体内并无血管生成，此为血管前期。这时的肿瘤生长依靠氧、营养物质的弥散来维持，肿瘤直径一般仅能长到2-3mm。此期的肿瘤细胞增殖和凋亡处于平衡状态，生长缓慢，可持续多年，相当于临床上的原位癌，几乎不发生转移。肿瘤的进一步生长有赖于随后的肿瘤血管生成的启动，促使肿瘤形成新生血管，进入血管化期。此期肿瘤组织主要以血流灌注的方式获取营养，肿瘤细胞呈指数生长且凋亡减少，肿瘤细胞的增殖和凋亡平衡被破坏，导致肿瘤生长加速。

内皮抑素（Endostatin）由胶原蛋白XⅧ的羧基末端非胶原区内的184个氨基酸构成，其分子量为20KD。Endostatin对体外内皮细胞具有明显的增殖抑制活性，体内亦可特异性地抑制内皮细胞增殖和新生血管的生成，从而抑制肿瘤生长。Endostatin发挥抑瘤作用的特点有：①对肿瘤血管内皮细胞增殖有选择性抑制作用；②对生长静止的内皮细胞无作用；③抑制肿瘤有量效依赖关系；④对不同类型的肿瘤的抑瘤率相近；⑤无耐药倾向、无不良反应。

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（tumor necrosis factor-relatedapoptosis-inducingligand,TRAIL）是肿瘤坏死因子（tumornecrosis factor,TNF）超家族的成员之一。它能选择性诱导肿瘤细胞凋亡，对大多数正常细胞无杀伤作用。TRAIL可通过与细胞膜上的死亡受体结合而激活凋亡信号通路，最终导致肿瘤细胞的凋亡。与其他TNF家族成员相比，TRAIL抗肿瘤活性强，对正常细胞几乎无毒性，因此受到人们的广泛关注。

肿瘤基因治疗的迅速发展使其成为除放疗、化疗和手术治疗之外的第四种肿瘤治疗模式。在众多的基因治疗载体中，应用腺病毒作为基因治疗的载体最为广泛，已经报道的1000多种基因治疗的临床方案中，约26%的基因治疗方案是用腺病毒作为载体。与其他病毒载体相比，腺病毒载体具有许多独特的优点，表现在：①腺病毒颗粒相对稳定，病毒基因组重排频率低，外源基因插入片段在病毒复制几个周期后仍可保持不变，易于重组DNA技术操作；②安全性较好，腺病毒无需整合进宿主细胞基因组中，目的基因在宿主细胞基因组外游离状态下表达，整合突变致癌可能性小，基因毒性低；③腺病毒基因组较大（36kb），绝大多数基因组（约35kb）均能被外源基因取代，插入大片段外源性基因的潜力大；④有较大的宿主范围，可以感染肝细胞、血管内皮等多种人体细胞，对于受体细胞是否处于分裂期要求不严格；⑤腺病毒载体容易将外源基因直接转移到靶细胞中，并有效表达成活性蛋白。以上一些优势使得腺病毒成为应用最为广泛的基因治疗载体。

发明内容

本发明的目的是提供一种联合治疗肿瘤的基因药物及其应用

本发明提供的用于预防和/或治疗肿瘤的组合物，其为如下1）-3）中的任意一种：

1）含有Endostatin蛋白编码基因的重组病毒和含有TRAIL蛋白编码基因的重组病毒组成的组合物；

2）由Endostatin蛋白和TRAIL蛋白组成的组合物；

3）含有Endostatin蛋白编码基因的重组载体和含有TRAIL蛋白编码基因的重组载体组成的组合物。

上述组合中，所述Endostatin蛋白为人源Endostatin蛋白；所述TRAIL蛋白为人源TRAIL蛋白。