[发明专利]检测结核的表面等离子共振生物传感器，制备方法及其应用

权利要求书

1.一种检测结核的表面等离子共振生物传感器，为双通道表面等离子共振仪，其特征在于，免疫芯片的表面修饰有CFP-10的抗体。

2.一种制备根据权利要求1所述检测结核的表面等离子共振生物传感器的方法，其特征在于，该方法的具体步骤为：

a.免疫芯片的处理：将芯片浸没在水虎鱼溶液中，即浓硫酸：过氧化氢的体积比为3:1，反应45s，然后用超纯水冲洗干净，氮气吹干；

b.将处理过的芯片浸没在0.1mM 的蛋白连接剂中10小时，蛋白连接剂通过金硫键反应自组装到芯片的表面，然后先后用氯仿、甲醇、超纯水冲洗，氮气吹干；

c.将芯片安装到表面等离子共振仪上，向反应池中注入100μL 2.5μg/mL的CFP-10的抗体，它通过与蛋白连接剂的反应固定到芯片表面，然后加入100 μL 0.1mg/mL牛血清白蛋白进行封板半小时，这就得到了检测结核的表面等离子共振生物传感器。

3.根据权利要求2所示的一种制备检测结核的表面等离子共振生物传感器的方法，其特征在于，所述的CFP-10的抗体以及牛血清白蛋白都是用含有0.15 M NaCl，10mM，pH为7.4的PBS缓冲液配制。

4.根据权利要求2所示的一种制备检测结核的表面等离子共振生物传感器的方法，其特征在于，所述蛋白连接剂为Prolinker^TM，用于固定CFP-10的抗体。

5.一种检测CFP-10的方法，采用根据权利要求1所述的检测结核的表面等离子共振生物传感器，其特征在于，该方法的具体步骤为：

a.向修饰好的芯片上加入待测溶液：待测液为内含0.15 M NaCl以及待测CFP-10的PBS缓冲液，pH 7.4，室温下反应半小时，然后PBS缓冲液冲洗；

b.向步骤a所得的芯片表面加入氧化镍纳米颗粒与CFP-10的抗体的复合物，用表面等离子共振仪，实时的检测反应的过程。

6.根据权利要求5所述的一种检测CFP-10的方法，其特征在于，所述氧化镍纳米颗粒与CFP-10的抗体复合物制备的具体步骤为：将0.1mg/mL的氧化镍纳米颗粒与2.5μg/mL的CFP-10的抗体等体积混合，摇床上孵育1小时，然后离心机离心3次，1200 rpm，20min，每次去除上清，然后加入等量的PBS缓冲液，最终除去上清，加入缓冲液将沉淀溶解，得氧化镍纳米颗粒与CFP-10抗体的复合物。