[发明专利]一种用于微量组织中代谢物组和脂质组同时提取分析的方法

权利要求书

1.用于微量组织中代谢物组和脂质组同时提取分析的方法，其特征在于：

通过甲醇MeOH、甲基叔丁基醚MTBE、水对待分析的微量组织样本进行提取；提取完成后离心，溶液分为两层，上层主要含有非极性的代谢物和脂质，下层主要含有极性和中等极性的代谢物；

上下层溶液混合冻干后复溶进行基于液相色谱-质谱联用的代谢组学分析，上层溶液冻干后复溶进行基于液相色谱-质谱联用的脂质组学分析。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于：进行提取的具体步骤如下，

1）将待分析的微量组织样本进行冷冻干燥，并准确称取1~25mg于离心管中；

2）加入300~500μL 75%的甲醇溶液并超声1~10min，然后加入500~2000μL的MTBE并振荡0.25~2h，然后加入150~350μL的水并振荡1~5min，静置5~20min后高速离心，溶液分为上下两层；

3）吸取部份上层溶液置于新的离心管中，将离心管中的溶液在冷冻干燥机上进行干燥；

同时吸取部份的上层和下层溶液置于另一新的离心管中进行混合，将离心管中的溶液在冷冻干燥机上进行干燥。

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于：75%甲醇溶液、MTBE和水的用量可以根据组织用量进行成比例的缩放；

75%甲醇溶液与MTBE的体积比例在1:5-1:2之间，水与MTBE的体积比例在1:5-1:2之间。

4.根据权利要求2或3所述方法，其特征在于：同时吸取部份的上层和下层溶液置于另一新的离心管中进行混合时，上层和下层混合的比例在3:1-1:1之间。

5.根据权利要求2所述方法，其特征在于：高速离心的转速为10000g~15000g，离心时间为5~20min。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于：冻干的提取物复溶后进行代谢组学和脂质组学分析的具体步骤如下：

1）权利要求2中所述的上下层溶液混合后的冻干物0.2~10mg加入50~2000μL20%~80%的甲醇或乙腈水溶液；振荡1~5min后高速离心，吸取上清液进行基于液相色谱-质谱联用的靶标或非靶标代谢组学分析；

2）权利要求2中所述的上层溶液冻干物0.1~5mg加入50~4000μL乙腈、异丙醇和水的混合溶液，混合体积比例为65:30:5；振荡1~5min后高速离心，吸取上清液进行基于液相色谱-质谱联用的靶标或非靶标脂质组学分析。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述微量组织为冷冻干燥后的动物或人的肝脏或肌肉组织。