[发明专利]阳离子型咪唑Gemini表面活性剂[Cn-s-Cnim]Br2在基因转染中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及阳离子型咪唑Gemini表面活性剂[C_n-s-C_nim]Br₂在基因转染中的应用，属于生物医药技术领域。 

背景技术

分子生物学的发展使疾病在分子水平上的基因治疗成为可能。基因疗法的整个过程为目的基因在载体的携带下进入细胞内部并实现基因修正和基因置换等，以纠正或补偿基因缺陷和异常引起的疾病，或者通过干扰特定基因的表达实现治疗的目的等（参见Qasba,P.K.等人，DNA and Gene Therapy:Transfer of Mouse DNA to Human and Mouse Embryonic Cells byPolyoma Pseudovirions,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1971,68,2345-2349；以及Xia,H.B.等人，siRNA-mediated gene silencing in vitro and in vivo,Nat.Biotechnol.2002,20,1006-1010），基因疗法的关键问题之一便是如何将目的基因导入细胞内部，若单独采用裸基因进行转染，基因片段难于被细胞摄取，而且即便裸基因能够进入细胞内，也会被胞内的核酸酶所降解。因此，寻找理想的基因载体是基因疗法所面临的一大难题。 

目前应用的基因载体可分为两大类：病毒载体和非病毒载体。病毒载体，主要包括反转录病毒、腺病毒和腺相关病毒等，它们转染效率较高，但由于受到免疫原性、承载DNA能力、细胞靶向性和成本等因素的影响，限制了其应用，参见Luo,D.等人，Synthetic DNAdelivery systems,Nat.Biotechnol.2000,18,33-37。非病毒载体，主要是阳离子载体通过其带正电荷的基团与DNA带负电荷的磷酸根发生静电作用，从而减弱DNA链上磷酸根负电荷之间的排斥作用,导致DNA弯曲、凝聚,甚至将DNA包载成一定大小的复合物进行传输,有关一些合成类物质用于基因转染的研究已引起人们的广泛关注。其中,非病毒载体研究较多的几类为:脂类（参见Felgner,P.L.等,Lipofection:A highly efficient,lipid-mediated DNA-transfectionprocedure,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1987,84,7413-7417）、聚电解质（polyethylenimine聚乙烯亚胺,参见Boussif，O.等人,A versatile vector for gene and oligo-nucleotide transfer into cellsin culture and in vivo:Polyethyenimine,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1995,92:7297-7301;dendrimers树枝状聚合物,参见Nylander,T.等人，DNA condensation using cationicdendrimers-morphology and supramolecular structure of formed aggregates,Soft Matter 2011,7,4577-4594）、高价阳离子物质（参见Leroux,J.C.等，Gene delivery with bisphosphonate-stabilized calcium phosphate nanoparticles,J.Control.Release 2011,150,87-93）等。尽管有关非病毒基因载体与DNA相互作用的研究受到了重视，但目前常用的阳离子型聚合物作为基因载体的一个很大局限性在于聚合物分子的大小和价态的非均一性，这种非均一性直接导致所制备的载体/DNA结构不同，给生物体内的释放研究带来巨大困难。因此，随着基因疗法的不断发展，需要发展新型的非病毒基因载体，提高载体/DNA结构的均一性，提高基因转染 的效率，最终提高基因治疗的效果。 

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种阳离子型咪唑Gemini表面活性剂[C_n-s-C_nim]Br₂在基因转染中的应用。